[发明专利]一种数字微流控自身免疫抗体多重检测系统在审
申请号: | 202110460449.6 | 申请日: | 2021-04-27 |
公开(公告)号: | CN113181981A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 苏阳;张研 | 申请(专利权)人: | 江苏液滴逻辑生物技术有限公司 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;G01N33/53;G01N33/564;G01N33/58 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 215300 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 数字 微流控 自身免疫 抗体 多重 检测 系统 | ||
1.一种数字微流控自身免疫抗体检测芯片,其包含上盖(1)、固定抗原(2)、导电层(3)、疏水层(4)、介电层(5)、基底(6)和电极(7)、试剂及样本分配区(8)、废液区(9)、样本溶液(10)、清洗液(11)、含荧光标记的二抗溶液(12);
其中,所述固定抗原(2)是将抗原按约定体积注射至上盖1的下表面,经过风干实现抗原固定的,所述下表面为面向电极的一面。
2.根据权利要求1所述的数字微流控自身免疫抗体检测芯片,其特征在于,所述固定抗原(2)为n个,n为≥1的正整数;
优选地,所述芯片包含m种含荧光标记的二抗溶液,m为≥1的正整数。
3.根据权利要求2所述的数字微流控自身免疫抗体检测芯片,其特征在于,所述芯片装载于检测设备之上并使所述芯片内充满生物兼容性介质油;
优选地,所述样本为全血、血清、血浆;
优选地,所述抗原通过机械臂注射至上盖(1)的下表面;
优选地,样本和/或试剂可以采用移液枪注射的方式、独立试剂包加载的方式或试剂在芯片中预埋的方式实现加载;
优选地,所述芯片可以包含多个不同形状尺寸的电极(7)。
4.一种数字微流控自身免疫抗体多重检测系统,其特征在于,所述系统包括权利要求1-3中任一项所述的数字微流控自身免疫抗体检测芯片。
5.根据权利要求4所述的数字微流控自身免疫抗体多重检测系统,其特征在于,所述系统还包括荧光检测模块,以实现定性或定量检测;
优选地,所述系统还包括电极设计或所述芯片的多个级联,以实现更高检测通量。
6.一种利用权利要求1-3中任一项所述的芯片或权利要求4或5中任一项所述的系统进行数字微流控自身免疫抗体多重检测的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)将芯片装载于检测设备之上并使芯片内充满生物兼容性介质油,在对应入口按规定体积加载样本及试剂;
(2)将样本(10)定量分配为n个样本液滴(13)并分别转移至n个固定抗原所在位置,进行孵育反应,孵育反应完成后将样本液滴(13)转移至废液区(9)丢弃;
(3)将清洗液(11)分配出n滴清洗液液滴(14),对固定抗原进行清洗,清洗完成后将清洗液液滴(14)转移至废液区(9)丢弃;
(4)将含荧光标记的二抗溶液定量分配为n个样本液滴(15)并分别转移至n个固定抗原所在位置,进行孵育反应,孵育反应完成后将样本液滴(15)转移至废液区(9)丢弃;
(5)将清洗液(11)分配出n滴清洗液液滴(14),对固定抗原进行清洗,清洗完成后将清洗液液滴(14)转移至废液区(9)丢弃;
(6)对n个固定抗原所在位置进行检测,进行样本中抗体含量定性或定量检测;
所述n个固定抗原所在位置为以m列排布,含荧光标记的二抗溶液为m种,并且,第一种含荧光标记的二抗溶液、第二种含荧光标记的二抗溶液……和第m种含荧光标记的二抗溶液分别与其中第一列固定抗原、第二例固定抗原……和第m列固定抗原进行反应;
其中,n为≥1的正整数;且m为≥1的正整数。
7.根据权利要求6所述的数字微流控自身免疫抗体多重检测的方法,其特征在于,步骤(6)所述检测为采用荧光检测模块实现样本中抗体定性或定量检测。
8.根据权利要求6所述的数字微流控自身免疫抗体多重检测的方法,其特征在于,所述孵育反应的温度为4-45℃,优选为37℃;
优选地,所述孵育反应的时间为1-30min,优选为3-5min。
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