[发明专利]一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法

说明书

本发明提供了一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法，涉及中药组培快繁技术领域。本发明通过诱导愈伤组织、愈伤组织增殖分化培养和生根培养，从而周年获得大量纯正膜荚黄芪的种苗。利用本发明所述的组培快繁方法得到的膜荚黄芪丛生芽增殖系数达到13～15倍，丛生芽健壮，接种到开放式生根培养基上容易生根，生根率达90％以上，且后期移栽成活率90％以上，获得优质膜荚黄芪种苗。本发明不受时间和空间限制，可周年实现工厂化培育，满足生产需要。

技术领域

本发明属于中药组培快繁技术领域，具体涉及一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法。

背景技术

膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(fisch.)Bunge)为豆科多年生草本植物，国家3级保护植物，是药典黄芪的正品，产于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山西、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、山东及四川，生长于林缘或灌丛疏林下，黄芪原名黄耆，始载于《神农本草经》，宋《图经本草》载：“今出原州(宁夏固原)及华原(陕西耀县)者也佳”。宁夏六盘山地区是“原州黄芪”主产区，当地人民有长期人工驯化种植野生黄芪的历史。膜荚黄芪为黄芪上品，具有补气升阳，固表止汗，利水消肿等功效；为历代医家常用的中药材，市场需求量极大，近年来由于人工采挖，其野生资源在全国已濒临灭绝，目前，人工栽培的膜荚黄芪多与蒙古黄芪混杂，很难获得纯正的膜荚黄芪种苗，因此需要通过组培快繁方式和工厂化育苗技术培育出无性状分离、生长一致、品质纯正的膜荚黄芪种苗。目前还未见到关于膜荚黄芪组培快繁及工厂化育苗的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法，可解决膜荚黄芪种苗种源不清、品种混杂，缺乏纯正膜荚黄芪种苗的现状，并且可周年实现工厂化培育，满足生产需求。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法，包括以下步骤：(1)以膜荚黄芪的幼嫩组织为外植体，将所述外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤诱导培养，得愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基以Ms培养基为基本培养基，还包括以下浓度的组分：1.0～3.0mg/L 2,4-D、0.3～0.5mg/L6-BA、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉，pH值为5.5～5.8；

(2)将所述愈伤组织接种到增殖分化培养基上进行增殖分化培养，得丛生芽；所述增殖分化培养基以Ms为基本培养基，还包括以下浓度的组分：1.0～2.0mg/L 6-BA、0.2～0.4mg/L NAA、0.1～0.2mg/L IAA、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉，pH值为5.5～5.8；

(3)将所述丛生芽分割成单芽，接种到开放式生根培养基上进行生根培养，得膜荚黄芪组培快繁苗；所述开放式生根培养基以1/2Ms培养基为基本培养基，还包括以下浓度的组分：0.3～0.5mg/L IBA、0.5～1.0mg/L IAA、1.0～2.0ml/L抑菌剂、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉。

优选的，步骤(1)所述幼嫩组织包括幼嫩的叶片和茎段。

优选的，步骤(1)所述外植体在接种前，还包括预处理，所述预处理包括用流动的清水冲洗所述外植体30min，用质量百分含量为2％的次氯酸钠水溶液处理10min，无菌水冲洗3～4次，再用0.1％的升汞溶液浸泡6min，无菌水冲洗3～4次。

优选的，步骤(1)所述愈伤诱导培养的温度为21～23℃，先暗培养10～14d，再光照培养7～10d；所述光照培养时每天的光照时间为14h，光照强度为2000～3000Lux。

优选的，步骤(2)所述增殖分化培养的温度为23～25℃，光照时间为14h/d，光照强度为2000～3000Lux；所述增殖分化培养每21d继代培养1次，继代培养2～3次。