[发明专利]区分油菜莫利细胞质不育株和可育株的田间鉴别方法

说明书

本发明公开了区分油菜莫利细胞质不育株和可育株的田间鉴别方法，通过油菜莫利细胞质杂交种与油菜纯系品种进行第一轮杂交，收获F₁代，然后将F₁与油菜萝卜细胞质杂交商品菜籽中的不育株进行第二轮杂交，通过结实情况即可判断油菜莫利细胞质不育株和可育株。本鉴别方法杜绝了待鉴定材料由于带有自交不亲和基因仅仅通过自交结实性进行判断结果不准确的问题。

技术领域

本发明属于杂交育种领域，具体涉及一种区分油菜莫利细胞质不育系株和可育株的田间鉴别方法。

背景技术

油菜为十字花科芸薹属植物，是世界主要的油料作物之一。目前生产上应用的油菜类型主要有甘蓝型油菜(Brassica napus L.)、芥菜型油菜(Brassica juncea L.)和白菜型油菜(Brassica rapa L.)。在油菜的杂种优势利用方面，细胞质雄性不育系统(CMS)分为2类，一类为孢子体雄性不育，如波里玛(Polima CMS)、萝卜胞质(Ogu CMS)等，这类不育系的雄蕊退化较彻底，在花期几乎没有可见花粉，通过目测即可辨认不育株和可育株。另外一种油菜雄性不育类型为配子体雄性不育，如莫利(M.arvensis)CMS^[1,2,3,4,5]，不育系的雄蕊外形保存较完整，雄蕊在花期可见大量无活力花粉，通过目测不能区分不育株和可育株^[4]。在油菜三系育种上，以保持系为轮回亲本，通过与细胞质雄性不育系统的不育株回交5代以上，回交后代即为与保持系对应的不育系。

油菜波里玛和萝卜胞质等孢子体雄性不育类型的不育株和可育株在花期通过观察对比花药退化程度和有无花粉可以鉴别；但莫利CMS等油菜配子体雄性不育类型的不育株和可育株花药外观正常且均有可见花粉，目测不能鉴别不育株和可育株。常规鉴别方法有2种：一种是取花粉在实验室进行醋酸洋红染色，通过显微镜观察花粉粒着色情况进行区分；第二种是通过套袋自交，根据自交结实情况进行鉴别。第一种方法需要在实验室操作，且需要一定的实验设备和试剂，鉴别门槛较高；第二种方法虽然简单，但当育种材料带有自交不亲和基因时，仅通过自交是否结实进行鉴定，存在一定的误判风险。

参考文献：

1.Prakash S,Kirti P B,Bhat S R,et al.A Moricandia arvensis-basedcytoplasmic male sterility and fertility restoration system in Brassicajuncea[J].Theor Appl Genet,1998,97:488-492

2.Kirti P B,Prakash S,Gaikwad K,et al.Chloroplast substitutionovercomes leaf chlorosis in a Moricandia arvensis-based cytoplasmic malesterile Brassica juncea[J].Theor Appl Genet,1998,97:1179-1182

3.Singh K H.Hybrid development in mustard(Brasica juncea L.)-Asuccess story[J].Sarson News,2008,12(2):2-3

4.Bhat S R,Prakash S,Kirti P B,et al.Aunique introgression fromMoricandia arvensis confers male fertility to two different cytoplasmic malesterile lines of Brassica juncea[J].Plant Breeding,2005,124:117-120

5.雷绍林,杜才富,陈丽,等.芥菜型油菜莫利(Moricandia arvensis)细胞质雄性不育系统研究进展[J].中国油料作物学报,2018,040(002):297-301。

发明内容