[发明专利]一种高山杜鹃组培繁殖方法

说明书

本发明公开了一种高山杜鹃组培繁殖方法，包括如下步骤：S1、外植体诱导：将高山杜鹃的无菌外植体接种于诱导培养基中，诱导产生不定芽丛；S2、增殖及壮苗培养：将上述获得的不定芽丛切分后接入壮苗培养基中，培养成不定芽；S3、生根培养：将上述壮苗培养后的不定芽，接种于生根培养基中，培养28‑30天；再将不定芽取出并接入疏松多孔生根基质中，在无菌条件下培养，10‑15天开始诱导产生不定根，50‑60天长成具有完整根系的生根苗；S4、生根苗移栽：将上述生根苗进行移栽，获得成活高山杜鹃组培苗；本申请方法通过将壮苗培养的不定芽进行生根培养，将其培养成具有完整根系的生根苗，提高了高山杜鹃的移植成功率。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种高山杜鹃组培繁殖方法。

背景技术

高山杜鹃原产于我国，近年来，随着国内花卉市场的快速发展，高山杜鹃盆花作为高档年宵花，受到消费者的追捧，每盆售价300～1000元不等，甚至高达8800元。

目前，国内高山杜鹃盆花主要依赖从德国、比利时进口，价格居高不下；国内现有高山杜鹃原产地，仅有少量企业开展种苗生产和盆花生产。在国外，高山杜鹃种苗生产企业主要通过组织培养方式进行规模化生产；在国内，高山杜鹃种苗生产主要通过播种育苗，由于高山杜鹃的种子极小，需借助苔藓才能萌发，且幼苗生长缓慢，从而限制了高山杜鹃特定种或品种的规模化生产。

现有高山杜鹃组织培养时，通常是取高山杜鹃的茎段作为外植体，将外植体置于乙醇中浸泡消毒，多次无菌水冲洗后，再次利用灭菌剂进行灭菌后，继续利用无菌水冲洗的方式来完成外植体的灭菌；然后将浸泡灭菌后的外植体置于诱导培养基中诱导产生不定芽，最后将诱导产生的不定芽洗去培养基后在瓶外炼苗生根。这种培养方法中，一方面消毒方式步骤复杂，消毒时间长，而且高山杜鹃体毛较多，且体毛多分布在茎段等处，传统消毒灭菌过程很难达到彻底消毒，并对外植体造成较大损伤；另一方面，将诱导产生的不定芽直接在瓶外培养生根，这种生根培养方式需要在较为苛刻的温湿度环境下进行，并且生根时间较长，生根率较低。

公开号为CN102119660A的中国发明专利公开了一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，其在瓶苗出苗后，采用水培生根的方法在温室内生根培养后再进行移栽，在一定程度上提高了高山杜鹃组培苗的生根率和移栽成活率，但是该方法对温室内的温湿度和水的无菌条件要求较高，受季节性天气变化影响较大，更适合于春季使用。

发明内容

为了解决现有技术存在的上述问题，本发明目的在于提供一种高山杜鹃组培繁殖方法。

本发明所采用的技术方案为：

一种高山杜鹃组培繁殖方法，包括如下步骤：

S1、外植体诱导：将高山杜鹃的无菌外植体接种于诱导培养基中，诱导产生不定芽丛；

S2、增殖及壮苗培养：将上述产生的不定芽丛切分后接入壮苗培养基中，培养成不定芽；

S3、生根培养：将上述壮苗培养后的不定芽，接种于生根培养基中，培养 28-30天；再将不定芽取出并接入疏松多孔生根基质中，在无菌条件下培养， 10-15天开始诱导产生不定根，50-60天长成具有完整根系的生根苗；

S4、生根苗移栽：将上述生根苗进行移栽，获得成活高山杜鹃组培苗。

作为优选地，所述无菌外植体为高山杜鹃的花苞或/和花蕾中的顶芽。

作为优选地，所述步骤S1中，所述无菌外植体采用如下方法获得：

选取具有4-5厘米长花枝、膨大未绽放且内部保持完好无菌环境的花蕾，采用乙醇溶液喷洒在花蕾表面进行灭菌后，在无菌环境下利用无菌刀片逐层环剥花蕾的苞片，获得无菌花苞或/和无菌顶芽，该无菌花苞或/和无菌顶芽为无菌外植体。