[发明专利]一种用于检测人甲状腺球蛋白的胶体金试纸条

说明书

本发明涉及一种用于检测人甲状腺球蛋白的试纸条，包括底板，以及设置在底板上依次连接的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫，硝酸纤维膜上设置有检测线；胶体金结合垫中含有结合抗体标记的胶体金颗粒；检测线中锚定捕获抗体，结合抗体和捕获抗体均可特异性地识别和结合甲状腺球蛋白，并且互不干扰。本发明的胶体金试纸条，使用方便快速，能在10分钟内完成层析反应，并用于定量检测，帮助医生在短时间内判断外周血中的Tg含量是否超出正常值范围。半定量检测试纸条可供患者自己使用，便于患者日常自我监测。双功能试纸条可剔除Tg含量处于正常范围内的测试样本，大大减少临床检测的工作量。

技术领域

本发明属生物医学检测技术领域，具体涉及一种用于检测人甲状腺球蛋白的胶体金试纸条。

背景技术

甲状腺球蛋白(thyroglobulin，Tg)是由甲状腺滤泡上皮细胞分泌的糖蛋白，分子量约660kD,是甲状腺滤泡内胶质的主要成分，并且提供了甲状腺激素合成的基质和储存库，在甲状腺激素的生物合成中起着非常重要的作用。在健康者体内，只有极少量的Tg进入血液循环，推荐的Tg正常值为3-40ng/ml。一些疾病例如分化型甲状腺癌(DTC)可引起外周血中Tg含量的升高。因此，Tg是DTC的关键血清学指标，可协助DTC的初诊和确诊。在治疗后定期随访Tg的含量，可辅助监测DTC病人的预后和复发风险。

目前，Tg含量测定存在一些技术问题。首先，已知的可用于检测血液中Tg含量的单克隆抗体很少，需要研发更多的亲和力高特异性好的单克隆抗体，进行组合配对，用于检测Tg含量。其次，人外周血中成分复杂，因此外周血Tg含量的测定首先要分离血清，然后测定血清中的Tg含量。这种检测方法操作复杂，时间长，不利于临床操作。第三，外周血中还有可能含有自身Tg抗体，自身Tg抗体的存在对Tg定量检测的影响比较大。

因此，需要研发新的用于检测血液中Tg含量的抗体，以及寻找适当的抗体配对，进行双位点夹心检测。此外，还需要对检测用的试纸条进行进一步改进，以提供能够快速直接地检测外周血中Tg含量的试纸条。

发明内容

为解决以上问题，本发明提供了一种用于检测人甲状腺球蛋白(Tg)的试纸条，包括底板，以及设置在所述底板上依次连接的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维膜和吸水垫，所述硝酸纤维膜上设置有检测线；

所述胶体金结合垫中含有结合抗体标记的胶体金颗粒；所述检测线中锚定了捕获抗体，所述结合抗体和所述捕获抗体均可特异性地识别和结合甲状腺球蛋白，并且所述结合抗体和所述捕获抗体与甲状腺球蛋白结合的位点互不干扰。

本发明使用双抗夹心策略制备用于检测人甲状腺球蛋白(Tg)的胶体金试纸条，可在短时间内快速检测目标样品中是否含有Tg，帮助医生快速判断是否误切甲状旁腺。

在一个优选实施方案中，所述结合抗体为纳米抗体，包含三个CDR区，序列依次如SEQ ID NO:6-8所示。

优选地，所述结合抗体的可变区序列如SEQ ID NO:5所示。

在一个优选实施方案中，所述捕获抗体为纳米抗体，包含三个CDR区，序列依次如SEQ ID NO:2-4所示。

优选地，所述捕获抗体的可变区序列如SEQ ID NO:1所示。

使用AT8(序列如SEQ ID NO:1所示)捕获抗体，AT2(序列如SEQ ID NO:5所示)作为结合抗体，可高效特异地检测出样品中的Tg。AT2和AT8均是纳米抗体，仅仅包含具有4个框架区和3个CDR的重链可变区(VHH)，其稳定性搞，亲和力好，并且易于表达，有利于降低抗体制作成本。

在一个优选实施方案中，所述硝酸纤维膜上还设置有质控线，所述质控线比所述检测线远离所述胶体金结合垫。

在一个优选实施方案中，所述质控线中锚定了鼠抗羊驼IgG。