[发明专利]基于LEAPER技术靶向编辑RNA的方法和药物

权利要求书

1.一种基于LEAPER技术靶向编辑细胞中靶标RNA的方法，其中所述靶标RNA包含含有鸟苷(G)到腺苷(A)突变位点(靶标腺苷)的α-L-艾杜糖醛酸酶(α-L-iduronidase，IDUA)的基因转录本序列，所述突变位点是NM_000203.4(IDUA)-c.1205GA(p.Trp402Ter)或其相应的突变位点，该方法包括：

将arRNA或包含所述arRNA编码序列的构建体导入所述细胞中，其中所述arRNA包含与所述靶标RNA杂交的互补RNA序列，并且其中所述arRNA与所述靶标RNA杂交后能够招募作用于RNA的腺苷脱氨酶(ADAR)以使靶标RNA中的靶标腺苷脱氨基；

其中所述arRNA长度≥61nt且＜111nt；并且所述arRNA的靶向核苷距离所述arRNA的3’末端的距离不小于9nt，所述靶向核苷距离所述arRNA的5’末端的距离不小于25nt。

2.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA上与靶标腺苷相对的核苷(靶向核苷)为胞苷(C)、腺苷(A)或尿苷(U)。

3.根据权利要求1的方法，其中所述靶标腺苷与其5’最近邻核苷和3’最近邻核苷组成靶标三联体，该靶标三联体为5’-UAG-3’。

4.根据权利要求1的方法，其中所述靶向核苷的5’最近邻核苷为C、G或U。

5.根据权利要求1的方法，其中所述靶向核苷的3’最近邻核苷为A。

6.根据权利要求1的方法，其中所述靶向核苷与其5’最近邻核苷和3’最近邻核苷组成靶向三联体，该靶向三联体为5’-CCA-3’。

7.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA的靶向核苷距离所述arRNA的3’末端的距离小于所述靶向核苷距离所述arRNA的5’末端的距离。

8.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA的靶向核苷距离其3'末端为选自9nt-60nt中的任一整数个nt。

9.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA的靶向核苷距离其5’末端为选自25nt-60nt中的任一整数个nt。

10.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA选自下述任一长度特征的arRNA：

55nt-c-35nt、55nt-c-25nt、55nt-c-24nt、55nt-c-21nt、55nt-c-20nt、55nt-c-19nt、55nt-c-18nt、55nt-c-17nt、55nt-c-16nt、55nt-c-15nt、55nt-c-14nt、55nt-c-13nt、55nt-c-12nt、55nt-c-11nt、55nt-c-10nt、55nt-c-9nt、50nt-c-20nt、50nt-c-15nt或45nt-c-20nt，其中C为arRNA中与靶标腺苷相对的靶向核苷，arRNA的方向为5’至3’的方向。

11.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA选自下述任一长度特征的arRNA：55nt-c-20nt、55nt-c-15nt、55nt-c-14nt。

12.根据权利要求1的方法，其中所述arRNA包含一种或多种化学修饰。

13.根据权利要求12的方法，其中所述化学修饰选自如下的一种或多种：2’-O-甲基化修饰、核苷酸间连接的硫代磷酸酯修饰、脱氧核糖核苷替代修饰、LNA修饰、2’-O-(2-甲氧乙基)修饰。