[发明专利]一种脂肪干细胞重编程为神经元的方法及负载该神经元的细胞适应性水凝胶修复脊髓损伤有效
申请号: | 202110401362.1 | 申请日: | 2021-04-14 |
公开(公告)号: | CN113151181B | 公开(公告)日: | 2022-11-29 |
发明(设计)人: | 邓宇斌;边黎明;苑伟豪 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属第七医院(深圳) |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/12;C12N15/113;C12N15/85;A61K35/30;A61P25/00;A61L26/00 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 颜希文;杨虹坤 |
地址: | 518000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 干细胞 编程 神经元 方法 负载 细胞 适应性 凝胶 修复 脊髓 损伤 | ||
1.一种重编程脂肪干细胞获得神经元的方法,其特征在于,所述方法为:
将沉默PSEN1表达的工具转染至脂肪干细胞中,以Neurobasal神经诱导培养基继续培养后获得神经元;
所述沉默PSEN1表达的工具为siRNA,siRNA针对PSEN1基因沉默的靶序列如SEQ ID NO:1~3所示;siRNA针对PSEN1基因沉默的靶序列如SEQ ID NO:1所示;针对如SEQ ID NO:1所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:4所示,其反义链序列如SEQ ID NO:5或SEQID NO:6所示;针对如SEQ ID NO:2所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:7所示,其反义链序列如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9所示;针对如SEQ ID NO:3所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:10所示,其反义链序列如SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12所示。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述siRNA序列中的各正义链和反义链的3'端均以UU或dTdT为悬垂修饰。
3.沉默PSEN1表达的工具在制备将脂肪干细胞转变为神经元的重编程工具中的应用,其特征在于,将沉默PSEN1表达的工具转染至脂肪干细胞中,以Neurobasal神经诱导培养基继续培养后获得神经元;
所述沉默PSEN1表达的工具为siRNA,siRNA针对PSEN1基因沉默的靶序列如SEQ ID NO:1~3所示;siRNA针对PSEN1基因沉默的靶序列如SEQ ID NO:1所示;针对如SEQ ID NO:1所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:4所示,其反义链序列如SEQ ID NO:5或SEQID NO:6所示;针对如SEQ ID NO:2所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:7所示,其反义链序列如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9所示;针对如SEQ ID NO:3所示的靶序列的siRNA的正义链序列如SEQ ID NO:10所示,其反义链序列如SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12所示。
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