[发明专利]一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法

权利要求书

1.一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将鼠李糖脂发酵液过滤，收集滤液，离心，取上清液；

(2)用酸调节步骤(1)上清液的pH，使鼠李糖脂析出，静置，离心，收集沉淀；

(3)用碳酸氢钠溶液重悬步骤(2)的沉淀，自然沉降，收集上清液；

(4)用酸调节步骤(3)上清液的pH，使鼠李糖脂析出，静置，离心，收集沉淀；

(5)将步骤(4)的沉淀加入有机溶剂中进行萃取，收集有机相，将有机相与磷酸盐缓冲溶液混匀，静置分层，使有机相中的鼠李糖脂反萃取到水相中，下层水相即为纯化后的鼠李糖脂溶液；

步骤(5)所述磷酸盐缓冲溶液的pH为7～8；磷酸盐缓冲溶液的体积为有机相体积的1～3倍；所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.1～0.2mol/L；

步骤(5)所述有机溶剂为氯仿和乙酸乙酯中的至少一种；步骤(5)所述有机溶剂与步骤(4)沉淀的质量比为10：1～20：1。

2.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(3)所述碳酸氢钠溶液的浓度为0.05～0.1mol/L，溶剂为水。

3.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(3)所述碳酸氢钠溶液与步骤(2)沉淀的质量比为10：1～20：1。

4.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(2)和(4)所述酸均为磷酸、盐酸和硫酸中的至少一种，所述酸以溶液的形式加入，酸溶液的浓度为4～6mol/L，将上清液的pH调至2～3。

5.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(3)所述重悬、自然沉降和收集上清液的操作重复1～3次，重复1次的操作即是将所得的上清液用碳酸氢钠溶液重悬，自然沉降后收集上清液。

6.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(2)和(4)所述静置均为在4℃环境中静置8～12h。

7.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(1)所述离心指收集到的鼠李糖脂发酵液在8000～10000rpm下离心10～15min；步骤(2)和(4)所述离心均指在4000～10000rpm下离心8～10min。

8.根据权利要求1所述一种分离纯化生物表面活性剂鼠李糖脂的方法，其特征在于，步骤(5)所述有机溶剂萃取1～5次。