[发明专利]一种以茎尖为外植体的植物组织培养快繁方法

权利要求书

1.一种以茎尖为外植体的植物组织培养快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）外植体的消毒处理：取植株上的茎尖作为外植体，表面消毒处理；所述植株为川芎或者豆薯或者四棱豆；

（2）生根培养：将消毒后的茎尖转移到生根培养基上，在24～26℃、每天光照12～16小时、光照强度为1000～1500 Lx条件下进行培养；

川芎的生根培养基为1/2MS+IBA 0.2～0.5 mg/L+NAA 0～0.5 mg/L +蔗糖15～30 g/L+琼脂6～10 g/L；

豆薯的生根培养基为MS+NAA 0.3～0.7 mg/L+IBA 0.5～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+琼脂6～10 g/L；

四棱豆的生根培养基为MS+NAA 0～0.5 mg/L+IBA 0～2 mg/L+蔗糖15～30 g/L+琼脂6～10 g/L；

（3）炼苗和移栽：在生根培养基中培养至茎尖基部再生的不定根长至1～4 cm时，打开瓶盖，在室内进行炼苗后，将组培苗从培养瓶中取出，去掉根部的培养基，将其移栽至基质中种植。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述茎尖为2 cm～5 cm长度，消毒是采用酒精和次氯酸钠消毒。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述茎尖为2 cm～4 cm长度，所述消毒的方法具体指先将茎尖用水清洗，然后用酒精处理20～40 s，再用次氯酸钠处理2～5min，最后用无菌水清洗干净。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述消毒的方法具体为：将茎尖在流水下小心冲洗1～2 h，然后在超净台中用无菌水清洗3次，接着用70％或75％酒精处理30 s，再用2%次氯酸钠溶液处理4 min，最后用无菌水清洗3次。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中的所述生根培养基中还含有头孢霉素。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述头孢霉素在培养基中的浓度为300 mg/L。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培养基为1/2MS+IBA 0.2～0.4 mg/L+NAA 0.2～0.4 mg/L +蔗糖19～21 g/L+琼脂7～9 g/L，pH5.6～5.8。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述川芎的生根培养基为1/2MS+IBA 0.25mg/L+NAA 0.25 mg/L +蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培养基为MS+NAA 0.4～0.5mg/L+IBA 0.7～1.5 mg/L+蔗糖18～22 g/L+琼脂6～10 g/L，pH5.6～5.8；

所述四棱豆的生根培养基为MS+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于：所述豆薯的生根培养基为MS+IBA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L +蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中在生根培养基中培养至茎尖基部再生的不定根长至1～3 cm时，打开瓶盖，在室内炼苗3～5天后移栽至基质中后按照川芎或豆薯或四棱豆的常规幼苗田间管理方法栽培管理。