[发明专利]一种抗体稀释液的改良方法

说明书

本发明涉及一种抗体稀释液的改良方法，其中包括开发一种新型抗体稀释液，可有效提高抗原抗体的结合率，并且缩短孵育时间。本发明涉及的一种新型抗体稀释液，由聚乙二醇水凝胶和常用的抗体稀释液TBST混合组成。水凝胶独特的记忆性，在抗原抗体结合以后对结合部分进行包绕，从而使其形成稳定的“抗原‑抗体复合物”，有效防止了抗原抗体脱离的情况，大大缩短了孵育时间。因此，在进行Western‑Blot实验过程中，经改良后的抗体稀释液提高了抗体效价，降低了实验难度和实验费用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，用于抗原抗体特异性结合。

背景技术

在众多生物实验当中，免疫实验方法几乎占据了半壁江山，包括免疫荧光，免疫组化，免疫印迹，免疫共沉淀等。这些实验的核心都是依赖于抗原抗体的特异性结合。所以抗体的选择就很重要。现在实验人员用的主要是包括CST，Abcam，Sigma在内的几家大公司生产的抗体，价格高昂，且因为海关等原因常常面临货期跟不上的问题。之所以实验人员只偏爱于这几家公司的抗体，而很多国产的抗体无人问津，是因为这几家公司的抗体相对来说能比较稳定地与抗原结合。抗原抗体结合的影响因素有很多：浓度，特异性，温度，时间，接触率，PH值，电解质等。抗原抗体结合主要依靠抗原抗体间的疏水作用，范德华作用，氢键和静电作用。抗原表位和抗体结合以后接触面脱水，局部熵增，导致抗体效价降低。为了促进抗原抗体稳定结合，我们开发了一种新型抗体稀释液，里面独有的水凝胶成分，稳定局部熵值，可有效促进抗原抗体结合。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗体稀释液的改良方法，可有效提高抗体抗原结合率，并且缩短孵育时间。

为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种抗体稀释液改良的方法，通过将聚乙二醇水凝胶添加到常用的抗体稀释液TBST中，水凝胶独特的记忆性，在抗原抗体结合以后对结合部分进行包绕，从而使其形成稳定的“抗原-抗体复合物”，有效防止了抗原抗体脱离的情况，大大缩短了孵育时间。

另一方面，本发明提供了一种改良抗体稀释液在Werstern-Bolt实验中的应用方法，通过制胶、配置电泳液、固定胶、配转膜液、转膜，孵育一抗中通过聚乙二醇水凝胶与TBST的混合处理，促进抗原抗体结合，有效缩短了一抗孵育时间。因此，提高了抗体效价，降低了实验难度和实验费用。

附图说明

为了更清楚的说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为所述聚乙二醇水凝胶(②)固定抗原抗体复合物(①)示意图；

图2为Western-Blot实验中普通抗体稀释液(①)与改良抗体稀释液(②)的显影对比。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的原件或具有相同或类似功能的原件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

一方面，本发明提供了一种抗体稀释液改良的方法，请参阅图1，通过将聚乙二醇水凝胶添加到常用的抗体稀释液TBST中，水凝胶独特的记忆性，在抗原抗体结合以后对结合部分进行包绕，从而使其形成稳定的“抗原-抗体复合物”，有效防止了抗原抗体脱离的情况，大大缩短了孵育时间。

第二方面，请参阅图2，本发明提供一种提供了一种改良抗体稀释液在Werstern-Bolt实验中的应用方法，包括：

1.制胶

快速制胶试剂盒制胶

下层胶溶液加下层胶缓冲分别加2.5ml+2.5ml，加促凝剂50ul配制成下层胶。