[发明专利]一批识别IFP35家族蛋白的单克隆抗体及其在免疫识别等方面的应用

说明书

本发明专利公开了2株（编号分别为mAb136、mAb218）可以异性识别干扰素诱导蛋白IFP35（Interferon‑induced Protein 35）和NMI（N‑Myc Interactor）的单克隆抗体。这些单克隆抗体稳定性好、特异性强，利用本发明中的这些单克隆抗体可以通过免疫印迹分析准确识别动物或者人体组织中的IFP35和NMI蛋白，为相关的分子生物学研究以及临床上相关疾病的判断提供依据。本发明专利提供了这些抗体的可变区序列。这些抗体可以被用来作为免疫识别试剂，制备特异性吸附类医疗器械（可以特异吸附除去或者收集目标蛋白等）及制备抗体药物等方面。

技术领域

本发明属于生命科学、分子生物学和诊断试剂领域。主要涉及一批特异性识别IFP35和NMI蛋白的单克隆抗体及其作为免疫印迹检测试剂的应用。

背景技术

IFP35家族蛋白是一种干扰素诱导蛋白，包含IFP35和NMI两个家族成员。在没有干扰素诱导的情况下，细胞内的IFP35和NMI表达量很低，在IFN诱导下表达量显著升高。IFP35和NMI被报道在癌症发生和发展、免疫反应以及病毒感染中发挥作用。机体组织感染或者损伤时，IFP35和NMI迅速释放，可以激活天然免疫应答，当免疫系统过度激活，就会触发细胞因子风暴，引起全身炎症性疾病甚至死亡。比如脓毒症，是一种感染、烧创伤、中毒等急危重患者的严重炎症反应并发症。据WHO统计，全球每年约3000万人罹患脓毒症，其中约500万人死亡，病死率高。这些急性感染情况下，IFP35和NMI在血液中含量提升。其它一些慢性炎症疾病及自身免疫疾病可能也与血液中或体液中的IFP35和NMI相关。因此，临床上针对IFP35和NMI的各类检测试剂可能对检测疾病的进展具有重要价值，而相关的医学基础研究也急切需要类似的检测试剂。

免疫印迹法及免疫荧光法是通过特异性抗体对凝胶电泳分离的细胞或生物组织样品、或者固定的细胞或组织进行结合并着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。而免疫印迹分析及免疫荧光法实施的基础就是需要特异性识别目的蛋白的单克隆抗体或者单域抗体或者特意识别多肽序列或者其它特异结合的小分子化合物等。

本发明的目的是为了解决上述问题而提供了一些特异性识别IFP35和NMI蛋白的单克隆抗体及其可变区序列。利用这些单克隆抗体可以通过免疫印迹分析及免疫荧光法在IFP35(35kDa)和NMI(37kDa)蛋白相对应位置曝光出特异性条带或者光斑。

发明内容

本发明提供2株可以通过免疫印迹分析特异性识别IFP35和NMI蛋白的单克隆抗体及其可变区序列。具体的信息如下：

mAb136重链可变区氨基酸序列：

EVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYAFSSSWLNWVKQRPGKGLEWIGRIYPGDGYTNYNGKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYFCARWGGFGYAMDYWGQGTSVTVSS(SEQ ID NO:1)

mAb136重链可变区CDR1：GYAFSSSW(SEQ ID NO:3)

mAb136重链可变区CDR2：IYPGDGYT(SEQ ID NO:4)

mAb136重链可变区CDR3：ARWGGFGYAMDY(SEQ ID NO:5)

mAb136轻链可变区氨基酸序列：

DIKMTQSHKFMSTSVGDRVSFTCKASQDVNTAVAWYQQKTGQSPKLLIYSASYRYTGVPDRFTGSGSGTDFTFTISSVQAEDLAVYYCQQHYSFPRTFGGGTKLEIK(SEQ ID NO:2)

mAb136轻链可变区CDR1：QDVNTA(SEQ ID NO:6)

mAb136轻链可变区CDR2：SAS(SEQ ID NO:7)