[发明专利]一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其步骤如下：

(1)将10～15mL正硅酸乙酯加入到3～8mL水中，搅拌混合，加入0.1～0.5mol/L的HCl水溶液调节pH至3.5～5.5，搅拌混合均匀；再往上述反应体系中加入0.5～1.5g聚乙二醇600，磁力搅拌12～24h，直至形成透明均一的溶液，即得到溶胶前驱体；

(2)通过Hummer’s法制备氧化石墨烯，然后与柠檬酸钠、氯金酸的发生氧化还原反应，得到金纳米粒子-还原氧化石墨烯溶液；再经洗涤、离心、冻干得到金纳米粒子-还原氧化石墨烯；

(3)将30～90μL步骤(1)制备的溶胶前驱体用10～60μL水稀释混匀，再将10～50μL步骤(2)制备的金纳米粒子-还原氧化石墨烯水溶液、5～45μL乳酸脱氢酶溶液、1～25μL甘油加入到上述稀释的溶胶前驱体中，形成均一混合溶液；

(4)将步骤(3)得到的均一混合溶液滴涂于光亮洁净的工作电极表面，放置于4℃湿润环境下，混合溶液在电极表面静置陈化成膜，从而制得丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器。

2.如权利要求1所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(2)中金纳米粒子-还原氧化石墨烯溶液的浓度为1～10mg/mL。

3.如权利要求1所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(3)是将乳酸脱氢酶用pH 7.4、浓度50mmol/L的PBS缓冲液溶解，制成乳酸脱氢酶浓度为1～10mg/mL的乳酸脱氢酶溶液。

4.如权利要求1所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(4)的工作电极为直径3mm的玻碳电极，在使用前需要经过抛光、清洗和干燥，得到表面光亮洁净的玻碳电极。

5.如权利要求4所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：是依次使用粒径为0.3μm和0.05μm的氧化铝粉对玻碳电极进行抛光，抛光后再依次使用去离子水、硝酸水溶液、乙醇水溶液超声清洗，最后在N₂下干燥，得到表面光亮洁净的玻碳电极。

6.如权利要求5所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：硝酸水溶液由硝酸和水体积比1：1混合得到，乙醇水溶液由无水乙醇与水体积比1：1混合得到。

7.如权利要求1所述的一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(4)是将3～8μL的均一混合溶液滴在玻碳电极表面，在4℃湿润环境下静置陈化8～12h成膜。

8.一种丙氨酸氨基转移酶生物电化学传感器，其特征在于：是由权利要求1～7任何一项所述的方法制备得到。