[发明专利]一种可直接输入人体的NK细胞运输液及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种可直接输入人体的NK细胞运输液，以体积百分比计，其组成为：乳酸钠林格注射液80％‑98.94％；20wt％的人血白蛋白1％‑20％；5wt％的葡萄糖注射液0.05％‑5％；50wt％的海藻糖溶液0.01％‑1％。本发明还提供了上述NK细胞运输液的制备方法和应用。本发明所提供的NK细胞运输液，输注前无需再进行处理，因其主要成分为医用注射级别，成分明确，可直接输入人体，方便快捷。

技术领域

本发明涉及免疫细胞技术领域，具体是涉及一种可直接输入人体的NK细胞运输液及其制备方法和应用。

背景技术

自然杀伤细胞（natural killer cells, NK）是天然免疫系统的一个重要组成部分，在机体抵抗病毒感染和抗肿瘤的过程中发挥关键作用，不需要预先的致敏便能杀伤发生恶性转化和感染的细胞，而不损伤正常细胞。主要分布于脾脏、骨髓、淋巴结和外周血等处，可在各种趋化因子的诱导下，向炎症等部位迁移。NK细胞表面存在多种抑制型和激活型的受体，各种信号通过这些受体的传递，实现NK细胞的抑制或激活。

NK细胞作为人体的重要免疫细胞，仅占外周血淋巴细胞的 5% ~ 10% ,其杀伤活性不受主要组织相容性复合体(MHC)限制，不依赖于抗体，能快速溶解某些肿瘤细胞进而发挥抗肿瘤作用，因此NK细胞抗癌功能的开发与应用是近年来癌症研究的重点内容。

NK细胞治疗中一个很重要的问题是如何解决NK细胞的运输问题，因为NK细胞从制备到使用需要一段时间，细胞处理完以后需马上输注(4小时内)，否则时间过长会影响细胞品质。

目前NK细胞运输方式通常有两种，一种是在液氮冻存状态下进行运输，另一种是常温培养基下运输。两种方法都存在一些弊端。液氮冻存状态下进行运输危险性高（液氮温度为-196℃），运输受限，而且细胞经过冻存后其活性会下降，对后续治疗造成影响。常温培养基下运输，耗费培养基过多，体积较大，到达目的地处理NK细胞时对处理人员、处理环境及仪器的要求较高，使其应用受到限制。加速NK细胞在临床的应用是大势所趋，所以研发一种有效的NK细胞运输液是非常有必要的。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种可直接输入人体的NK细胞运输液及其制备方法和应用，以解决现有技术中存在的技术问题。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。本发明提出的一种可直接输入人体的NK细胞运输液，以体积百分比计，其组成为：

乳酸钠林格注射液 80％-98.94％；

20wt％的人血白蛋白 1％-20％；

5wt％的葡萄糖注射液 0.05％-5％；

50wt%的海藻糖溶液 0.01％-1％。

NK细胞在采用上述的细胞运输保存液保存时，低温有助于降低细胞代谢而延长细胞保存时间。然而，NK细胞虽然处于低代谢状态，但仍需要一定的营养物质进行代谢。为了维持细胞的代谢，选用乳酸钠林格注射液、20wt％的人血白蛋白、5wt％的葡萄糖注射液及50wt%的海藻糖溶液，其中乳酸钠林格注射液，是一种平衡盐液，其电解质浓度、pH、渗透压等与细胞外液接近，可作为良好的细胞溶液。20wt％的人血白蛋白主要防止细胞在悬液中接团，细胞结团后输注会引起小血管的栓塞，也影响细胞的活率。5wt％葡萄糖注射液主要为细胞提供基础的能量供给。海藻糖是由两个葡萄糖分子以a,a,1,1-糖苷键构成非还原性糖，自身性质非常稳定，海藻糖可在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等条件下在细胞表面能形成独特的保护膜，有效地保护蛋白质分子不变性、不失活，对细胞具有保护作用。四种成分配合使用可以更好地保证NK细胞的正常活动代谢，提高对恶劣环境的适应能力，而且成分简单、明确，主要成分为医用级别，可直接输入人体，无任何风险。

进一步地，前述的可直接输入人体的NK细胞运输液中，其中所述NK细胞运输液，以体积百分比计，其组成为：