[发明专利]一种间充质干细胞培养血清加油包及其应用

说明书

本发明公开了一种间充质干细胞培养血清加油包，属于干细胞培养技术领域。包括：重组人血清白蛋白、维生素C、丙氨酸‑谷氨酰胺二肽、碱性成纤维生长因子、TGF‑β1、表皮生长因子、重组人胰岛素、柠檬酸铁、CaCl₂·2H₂O、CuSO₄·5H₂O、FeSO₄·7H₂O，还提供了进一步制备皮肤间充质干细胞的应用。将间充质干细胞培养血清加油包添如入人血清制得间充质干细胞培养血清，再与基础培养及混合得间充质干细胞培养基，其可使皮肤组织逆向生成间充质干细胞，速度快、稳定性高、安全可靠，为皮肤干细胞工程或者其他临床应用打下基础。

技术领域

本发明属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种间充质干细胞培养血清加油包及其应用。

背景技术

皮肤是人体最大的器官，参与抵御生物入侵、紫外线辐射以及防止水分丢失、调节体温维持个体外貌等方面起着十分重要的生理作用，其是人体免疫系统组成的重要的一部分，而皮肤细胞是构成这器官的基本单元，皮肤细胞基础研究领域是揭示皮肤健康、发育、预防、治疗的重要科研途径。

随着时间的增长或皮肤的使用，会导致皮肤老化。皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退，由此皮肤不能适应内外环境的变化，出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤的老化分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随年龄增长的自然老化。表现为皮肤变白，出现细小皱纹、弹性下降、皮肤松弛等。外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化。表现为皱纹、皮肤松弛、粗糙、淡黄或灰黄色的皮肤变色、毛细血管扩张、色素斑形成等。

现有对抗皮肤皱纹、皮肤松弛的方法，主要有防晒、日常护理、抗自由基、激光理疗和皮肤再生工程。防晒、日常护理、抗自由基主要是减缓老化过程，对已经老化皮肤作用不大，激光理疗是较为常用的方法，具有一定的修复效果，但存在修复效果不稳定、损伤相对大、术后恢复时间相对较长等弊端，皮肤再生工程可通过注射具有新生活性的间充质干细胞，帮助皮肤回复饱满状态，但体外培养皮肤间充质干细胞方法中使用的培养基，是由基础培养基和血清配置而成，而此类培养基具有以下缺点：

1、传代越多使细胞的原代活性越来越差，疗效显著降低，同时存在致瘤风险，每次传代时使用胰酶消化也会对细胞造成细胞表面信号丢失，传代细胞部分丧失干细胞活性，回注后效果不理想。

2、采用胰酶消化原代组织，从而分离表皮和真皮，再将真皮切碎后用胶原酶消化成单细胞，最后放入培养基中培养，该操作过程中酶会对细胞造成不可逆的损伤，使细胞得率低，同时还具有成本高、消化时间久，操作复杂等缺点。

因此，如何提供一种间充质干细胞培养血清，可添加入基础培养基使用，使皮夫组织培养速度快、安全性高、具有高效体内再生活性的干细胞是本领域亟待解决的问题。

发明内容

本发明公开了一种间充质干细胞培养血清加油包及其应用，安全性高、体内在生活性强。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种间充质干细胞培养血清加油包，包括：重组人血清白蛋白5-8ml、维生素C 10-20mg/ml、丙氨酸-谷氨酰胺二肽0.1-0.2mg/ml、碱性成纤维生长因子50-70ng/ml、TGF-β10.02-0.03ug/ml、表皮生长因子0.05-0.1μg/ml、重组人胰岛素15-30μg/ml、柠檬酸铁0.1-0.2μg/ml、CaCl₂·2H₂O 0.3-0.5mg/ml、CuSO₄·5H₂O 0.25-0.4mg/ml、FeSO₄·7H₂O 0.2-0.3μg/ml；

血清白蛋白为50mg/ml的水溶液；，