[发明专利]用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置及方法

权利要求书

1.用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，主要包括离心机主体（1）、叶片处理装置（2）、加液装置（3）和移液装置（4）；

所述离心机主体（1）固定在水平台面上，离心机主体（1）中部设有圆柱空槽型的离心槽（11），所述离心槽（11）内设有离心柱（12），离心机主体（1）底部中心处设有与所述离心柱（12）底端连接的离心电机（13），所述离心柱（12）内部边缘处十字型设有四个用于放置试管的试管槽（14），离心柱（12）中心处设有用于自动对所述试管槽（14）内试管进行压盖密封的自动压封器（15）；

所述叶片处理装置（2）包括固定设置在所述离心机主体（1）左侧端的固定架（21）、安装在所述固定架（21）上端的匀浆机（22）、安装在固定架（21）中部的匀浆容器（23）和安装在固定架（21）中下部的过滤器（24），

所述匀浆容器（23）包括活动套接在所述固定架（21）上的套杆（231）和活动安装在所述套杆（231）远端的匀浆杯（232），所述匀浆杯（232）下端设有出料漏斗（234），所述出料漏斗（234）与匀浆杯（232）连接处设有排液阀（235）；

所述过滤器（24）包括套接在所述固定架（21）上的活动套杆（241）和活动安装在所述活动套杆（241）远端的集液杯（242），所述集液杯（242）上端设有多层一次性纱布，所述集液杯（242）侧壁下部设有出液阀（245）；

所述加液装置（3）包括固定设置在所述离心机主体（1）后侧端的旋转架（31）和分别安装在所述旋转架（31）两侧的低渗缓冲液罐（32）、增溶液罐（33），所述低渗缓冲液罐（32）侧壁下端外侧设有加液阀一（321），所述增溶液罐（33）侧壁下端外侧设有加液阀二（331），所述加液阀一（321）和加液阀二（331）均可旋转至所述试管槽（14）正上方；

所述移液装置（4）包括固定设置在所述离心机主体（1）右侧端的移液架（41）、固定安装在所述移液架（41）底部的负压取液机（42）和安装在所述移液架（41）顶端的伸缩取液管（43）；

所述伸缩取液管（43）下端活动套接有可更换的一次性取液管（44）；

所述离心柱（12）内还设有负压发生器（17），所述负压发生器（17）通过内部管道与四个所述试管封盖（155）连通，用于使试管内形成负压环境。

2.根据权利要求1所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述离心机主体（1）前侧端面上设有控制面板（16）。

3.根据权利要求1所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述试管槽（14）内设有用于固定所述试管的固定夹（141）。

4.根据权利要求1所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述自动压封器（15）包括固定设置在离心柱（12）内部的微型液压泵（151）、连接在所述微型液压泵（151）上侧输出端的液压升降杆（152）、安装在所述液压升降杆（152 ）顶端的电控旋转头（153）、呈十字型固定安装在所述电控旋转头（153）侧边的四个连接杆（154）和分别设置在四个所述连接杆（154）远端的试管封盖（155）。

5.根据权利要求1所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述匀浆杯（232）上端活动设有防溅盖（233），所述匀浆机（22）底端的机头可贯穿所述防溅盖（233）置于所述匀浆杯（232）内部。

6.根据权利要求5所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述匀浆机（22）底端的机头可贯穿所述防溅盖（233）置于所述匀浆杯（232）内部。

7.根据权利要求1所述的用于光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备装置，其特征在于，所述低渗缓冲液罐（32）与所述增溶液罐（33）均为隔温保存罐。

8.利用权利要求1-7任意一项所述提取制备装置进行光系统II内周天线CP43和CP47的提取制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

S1：叶片处理

将叶片剪碎后放入匀浆杯（232）中，并向匀浆杯（232）中加入缓冲液，盖上防溅盖（233）后将匀浆容器（23）向上移动，使匀浆机（22）的机头伸入匀浆杯（232）内，开启匀浆机（22）对匀浆杯（232）内的叶片进行匀浆处理，处理结束后打开排液阀（235）将匀浆液排至过滤器（24）中，匀浆液经过多层一次性纱布过滤去除残留叶片后进入集液杯（242）收集；

S2：叶绿体分离

在试管槽（14）内放置试管，将试管转动至出液阀（245）下方，打开出液阀（245）将过滤后的匀浆液加入至试管中，利用自动封压器（15）将试管密封后开启离心电机（13）进行离心，离心结束后用移液装置（4）将位于试管中部的叶绿体取出；

S3：类囊体膜制备

将一空白试管转动至移液装置（4）的伸缩取液管（43）下方，将步骤S2取得的叶绿体转移时空白试管内，然后将加液装置（3）的低渗缓冲液罐（32）转动至试管上方，向试管内加入低渗缓冲液，用自动封压器（15）将试管密封后开启负压发生器（17），使试管内形成负压条件，加速叶绿体的胀破，然后开启7离心电机（13）进行离心，离心结束后更换伸缩移液管（43）上套接的一次性取液管（44），然后用移液装置（4）抽取试管内含有类囊体膜的上清液；

S4：PSII颗粒制备

将一空白试管转动至移液装置（4）的伸缩取液管（43）下方，将步骤S3取得的上清液转移时空白试管内，然后将加液装置（3）的增溶液罐（33）转动至试管上方，向试管内加入增溶液，利用自动封压器（15）将试管密封后开启离心电机（13）进行离心，离心结束后用移液装置（4）抽取试管内含有光系统II的上清液；

S5：PSII放氧核心复合物制备

将步骤S4中取得的上清液电泳处理后用离子交换柱洗脱得到PSII放氧核心复合物；

S6：CP43和CP47的提取制备

将步骤S5中制备得到的PSII放氧核心复合物用填充不同缓冲液的离子交换柱分别洗脱，得到CP43和CP47。