[发明专利]一种过氧亚硝基阴离子和粘度双响应型荧光探针及其制备和应用

说明书

本申请公开一种过氧亚硝基阴离子和粘度双响应型荧光探针及其制备和应用，双响应型荧光探针结构式如式I所示：本申请提供的双响应型荧光探针的制备方法简单，只需要简短的反应路线即可得到。本申请的探针自身的荧光微弱可在不同激发/发射通道下分别检测溶液和细胞环境中的ONOO^‑和粘度，可用于制备ONOO^‑浓度和粘度检测试剂。该探针检测效果良好，抗干扰能力强，为研究ONOO^‑和粘度的生物关联性提供了一种新型的潜在有力分析工具。

技术领域

本申请涉及荧光探针检测技术领域，具体涉及一种过氧亚硝基阴离子和粘度双响应型荧光探针及其制备和应用。

背景技术

新型高效的荧光探针检测技术有助于人们更加深入了解诸多生理和病理的发生机制，已被广泛应用于生命健康领域。然而，目前已开发的荧光探针大多是单响应型荧光探针，即只能在单一荧光通道下实现特异性识别单一分析物，无法满足研究多种分析物在生物体内的生物关联性的需求。因此，常规的单响应型荧光探针具有一定的局限性。双响应型荧光探针，不同于单响应型荧光探针，可在不同荧光通道下可分别检测两个不同的分析物，是研究多分析物在生物体内的生物关联性的有力工具之一。

发明内容

本申请提供一种荧光探针，可在不同荧光通道下分别检测ONOO^-和粘度，解决单响应型荧光探针的缺陷。

过氧亚硝基阴离子ONOO^-由于其高化学反应能力，是活性氧簇中的最有害的小分子。众多研究表明，ONOO^-可以破坏各类生物大分子，如蛋白质、脂类和核酸等。细胞内环境粘度是细胞正常活动的重要指标，对细胞内生物分子间的扩散、化学信号的传递起着至关重要的作用。为了进一步了解ONOO^-和粘度的生物学作用，大量能够特异性检测ONOO^-或粘度的单响应型荧光探针被报道，然而，能够分别检测ONOO^-和粘度的双响应型荧光探针仍十分稀缺。

本申请提供的双响应型荧光探针的制备方法简单，只需要简短的反应路线即可得到。本申请的探针自身的荧光微弱可在不同激发/发射通道下分别检测缓冲液和细胞环境中的ONOO^-和粘度，属于荧光探针检测技术领域。从实验数据可知，该探针在发射波长为570nm处对粘度具有响应能力，在发射波长为640nm处对ONOO^-具有响应能力。该探针检测效果良好，抗干扰能力强，可为研究ONOO^-和粘度的生物关联性提供了一种新型的潜在有力分析工具。

一种双响应型荧光探针，具有如式(I)所示的结构式：

本申请还提供一种所述荧光探针的制备方法，包括：

惰性气体保护下，将化合物2、化合物3和甲醇钠加入到溶剂中反应，反应液通过分离纯化后得所述荧光探针；

可选的，所述化合物2、化合物3和甲醇钠的物质的量之比为1:1.2～2:0.2～0.5；进一步为1:1.5:0.3。

化合物2为公开的化合物，其制备方法可参考文献(Wu Y Y,Yu W T,Hou T C,etal.A selective and sensitive fluorescent albumin probe for the determinationof urinary albumin[J].Chemical Communications,2014,50(78):11507-11480.)，化合物3为市购获得。

可选的，所述溶剂为乙腈。

可选的，反应条件为：40℃～50℃搅拌反应10h～14h。