[发明专利]一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法

说明书

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法，包括以下步骤：步骤a：利用稀释剂配制含利伐沙班的样品溶液；步骤b：将样品溶液注入超高效液相色谱仪，流动相A和流动相B混合后对样品溶液进行梯度洗脱，所述超高效液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；步骤c：洗脱后进入质谱仪，利用MRM多反应监测模式检测利伐沙班中间体的有关物质，离子源为ESI⁺。本发明提供的检测方法灵敏度高、准确度高、重现性好，可以有效分析检测利伐沙班有关物质含量，从而进行利伐沙班原料药杂质限度的质量控制，最终保证产品安全有效。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，涉及一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法。

背景技术

利伐沙班，化学名为5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]-1,3-唑烷-5- 基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，分子式是C₁₉H₁₈ClN₃O₅S，分子量是435.89，其结构式如下所示：

利伐沙班是一种每日一次口服抗凝剂，由拜耳公司和强生公司共同研发，获准用于预防髋关节或膝关节置换术后的静脉血栓栓塞和肺栓塞。与传统抗凝血剂相比，利伐沙班具有高安全性、高选择性和高效性等特点，可以直接抑制结合或游离状态的Xa因子，中断内、外源性的凝血途径，抑制凝血酶产生，是一种恶唑烷酮类新型抗凝药物。

在合成利伐沙班的工艺中，杂质残留将影响到利伐沙班的纯度、收率及质量，因此对利伐沙班工艺杂质进行有效的控制就显得尤为重要。目前利伐沙班有关物质的测定多采用高效液相色谱法，而高效液相色谱法对有关物质检测的检测限、定量限很难达到令人满意的结果。到目前为止，文献中未记载该工艺杂质的超高效液相色谱质谱联用技术分析检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法，该方法灵敏度高、准确度高、重现性好，可以有效分析检测利伐沙班有关物质含量，从而进行利伐沙班原料药杂质限度的质量控制，最终保证产品安全有效。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法，包括以下步骤：

步骤a：利用稀释剂配制含利伐沙班的样品溶液；

步骤b：将样品溶液注入超高液相色谱仪，流动相A和流动相B混合后对样品溶液进行梯度洗脱，所述超高液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，色谱条件如下：进样量为2～10μL、流动相流速为0.1～0.4mL/min、色谱柱柱温箱温度为30～50℃；

步骤c：洗脱后进入质谱仪，利用MRM多反应监测模式检测利伐沙班中间体的有关物质，离子源为ESI⁺；质谱条件如下：毛细管电压1.0～3.0kv、脱溶剂温度400～800℃、脱溶剂气流量500～1000L/Hr、锥孔电压20～50V；

所述利伐沙班中间体的有关物质包括杂质A、杂质B和杂质C中的一种或多种；

所述杂质A的结构式如下：

所述杂质B的结构式如下：

所述杂质C的结构式如下：

优选地，所述稀释剂为20～40％的乙腈水溶液。

优选地，所述流动相A为20mmol/L乙酸铵水溶液，流动相B为乙腈。

优选地，步骤b中所述梯度洗脱的条件如下：