[发明专利]一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法及其应用

权利要求书

1.一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：该iPSC来源干细胞外泌体制备方法的具体步骤如下：

S1：干细胞培养：获取干细胞组织，并对干细胞组织分割为小粒状，将小粒状的干细胞组织置于不含外泌体血清的培养基中培养，同时向培养基中充入过量氧气，对培养基保温在25摄氏度，且培养过程中，每隔30min对培养基晃动，使得氧气融入培养基中；

S2：多级离心获取上清：将步骤S1中培养基上层及培养后的小粒状的干细胞组织稀释，将稀释液置于离心机中2-4次离心，且每次离心获取上清液；

S3：对上清分离过滤获取外泌体：将步骤S2中最终获取的上清液通过分离得到外泌体；

S4：纯化外泌体：将步骤S3中得到外泌体稀释，再次离心分离，得到上清，将上清干燥即可得到纯化外泌体。

2.根据权利要求1所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述步骤S1中干细胞组织为脂肪干细胞组织，且脂肪干细胞组织从颈部，脸部，臂部，背部，腰部，臀部，腹部，大腿，小腿处的脂肪内采集。

3.根据权利要求1所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述小粒状的干细胞组织尺寸为2mm*2mm*1mm的长方体状。

4.根据权利要求1所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述步骤S1中小粒状的干细胞组织培养前状态为2-4代，所述小粒状的干细胞组织培养时间为4-5天。

5.根据权利要求1所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述步骤S2中离心机的转速为800-1000r/min，且每次离心时间为20-80min。

6.根据权利要求5所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述步骤S2中离心的方式为离心机转速由慢至快逐步升速，升速时间为10min，且升速后保持稳定速度离心运转。

7.根据权利要求1所述的一种iPSC来源干细胞外泌体制备方法，其特征在于：所述步骤S3分离获取外泌体操作的具体方式为：将离心后的上清出去，通过超滤膜对上清过滤，从一侧加压，使得液体及外泌体穿过超滤膜，小粒状的干细胞组织及杂质被阻挡在一侧。

8.一种iPSC来源干细胞外泌体的应用，其特征在于：该iPSC来源干细胞外泌体用于修复皮肤、治疗脱发、癌症早筛。