[发明专利]基于荧光D型氨基酸代谢标记的抗菌药敏试验检测方法

权利要求书

1.一种抗菌药敏试验检测方法，其通过评估细菌代谢活性来判断抗生素的抗菌效果和/或细菌耐药性，其特征在于，荧光D型氨基酸代谢标记物与抗生素溶液共同孵育菌液或待检测样品液，以检测获得与细菌生长速度和代谢活性相关的荧光标记信号强度和/或实时检测其荧光信号变化，来评估细菌生长过程中的细菌代谢活性；

分析其荧光信号强度获得待测抗生素最小抑制浓度，以得出抗菌性结果；所述待检测样品液为肺泡灌洗液、血培养阳性的血液样品；

所述抗菌药敏试验检测方法，其步骤包括：一定浓度下的菌液或待检测样品液与抗生素溶液以及荧光D型氨基酸代谢标记物混合后共同培养，获得特定时间的荧光标记信号强度和/或实时检测其荧光信号变化；

所述抗生素溶液采用梯度浓度；所述荧光D型氨基酸代谢标记物的终浓度为0.01-5mM，所述荧光D型氨基酸代谢标记物的终浓度为0.1-1mM；

所述荧光D型氨基酸代谢标记物为共价修饰有荧光基团的D型氨基酸；所述荧光D型氨基酸代谢标记物来自D-丙氨酸或其衍生物，更所述荧光D型氨基酸代谢标记物为D-型丙氨酸荧光探针；

所述荧光D型氨基酸代谢标记物包括四甲基罗丹明(TAMRA)DAA荧光探针、带有羧基荧光素(FAM)的DAA荧光探针、带有Cy5的DAA荧光探针、或如下化学式所示的D型氨基酸荧光探针

或如下化学式所示的D型氨基酸荧光探针

所述荧光D型氨基酸代谢标记物为D-型丙氨酸荧光探针。

2.根据权利要求1所述的抗菌药敏试验检测方法，其特征在于，所述抗生素包括青霉素类、头孢菌素类、巯青霉素烯类、氨基糖苷类、四环素类、酰胺醇类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类、喹诺酮类或硝咪唑类。