[发明专利]一种抗体或其抗原结合片段及其制备方法和用途

说明书

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗体或其抗原结合片段及其制备方法和用途。本发明所提供的抗体或其抗原结合片段可以结合于CD147，其中，所述抗体或其抗原结合片段的结合抗原表位包括CD147的Ala149、Asp136或Asp136的糖基化修饰、Tyr140或Tyr140的糖基化修饰、Gln195或Gln195的糖基化修饰、Asp194或Asp194的糖基化修饰、Pro104、Asp147或Asp147的糖基化修饰、Ser193或Ser193的糖基化修饰、Lys191或Lys191的糖基化修饰、Gly192。本发明所提供的抗体或其抗原结合片段，对于MCT1/CD147具有很高的亲和力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗体或其抗原结合片段及其制备方法和用途。

背景技术

肿瘤代谢具有异质性和Warburg effect。在远离灌注血管的地方，低氧环境中的肿瘤细胞依靠糖酵解来维持生存和增殖。ATP和中间代谢产物的供给取决于葡萄糖的高利用率，代谢产物乳酸的释放由MCT4参与完成。相比之下，尽管氧充足的肿瘤细胞也表达葡萄糖转运蛋白(GLUT)，但氧充足的肿瘤细胞对丙酮酸代谢偏好较高。MCT1将低氧肿瘤细胞释放的乳酸转运到氧充足的肿瘤细胞中，乳酸由乳酸脱氢酶氧化为丙酮酸并参与三羧酸(TCA)循环。氧化型肿瘤细胞对乳酸的代谢偏好使低氧型肿瘤细胞获得更多的葡萄糖。这种代谢协同性是体内低氧条件下肿瘤细胞存活的关键。因此MCT1和MCT4是偶联的肿瘤治疗靶点。

在多种癌组织中，CD147(细胞外基质金属蛋白酶诱导因子)除了可以协助MCT1/MCT4和GLUT1表达在癌细胞质膜以外，还可以充当内皮细胞中血管内皮生长因子2的共受体，增强血管内皮生长因子介导的信号传导，促进癌组织中的血管生成。目前研究发现，MCT1/4介导的乳酸传递，在肿瘤生长过程中发挥重要的作用，针对MCT1/4的小分子抑制剂AZD3965和7ACC2在临床实验和临床前实验中。但AZD3965和7ACC2只能高效针对MCT1，低效抑制MCT4，因此疗效受限。此外，一些正常的组织和细胞尽管不高表达CD147，但高表达MCT1或MCT4。这些组织和细胞将由于MCT1或MCT4的活性和功能受到AZD3965和7ACC2的抑制而受到损害。作为MCT1和MCT4的分子伴侣，CD147促进了MCT1和MCT4的质膜定位，在肿瘤生长侵袭和血管生成等过程中起到关键的作用，因此针对CD147的抑制型抗体将有潜力发展为治疗颅外实体瘤的药物。

而从结构上已得知CD147由一个单次跨膜结构域和由两个或三个IgG domain的胞外结构域组成，这种结构不利于小分子抑制剂的研发。

发明内容

鉴于上述现有小分子药物技术的缺点，本发明的目的在于提供一种抗体或其抗原结合片段及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明一方面提供一种抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段可以结合于CD147，其中，所述抗体或其抗原结合片段的结合抗原表位包括CD147的Ala149、Asp136或Asp136的糖基化修饰、Tyr140或Tyr140的糖基化修饰、Gln195或Gln195的糖基化修饰、Asp194或Asp194的糖基化修饰、Pro104、Asp147或Asp147的糖基化修饰、Ser193或Ser193的糖基化修饰、Lys191或Lys191的糖基化修饰、Gly192。

本发明另一方面提供一种分离的多核苷酸，编码上述的抗体或其抗原结合片段。

本发明另一方面提供一种构建体，含有上述的分离的多核苷酸。

本发明另一方面提供一种抗体的表达系统，所述表达系统含有上述的构建体或基因组中整合有外源的上述的多核苷酸。

本发明另一方面提供上述的抗体或其抗原结合片段的制备方法，包括如下步骤：在适合表达所述抗体的条件下，培养上述的抗体的表达系统，从而表达出所述的抗体或其抗原结合片段，纯化分离出所述的抗体或其抗原结合片段。