[发明专利]双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD及其应用

权利要求书

1.双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，所述双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD的制备方法包括如下步骤：

1)将对苯二酚和浓H₂SO₄溶解在超纯水中，然后在微波炉中加热1-5min，自然冷却，加入超纯水溶解后，转移至透析袋中透析12h，冻干，得碳量子点CQDs-OH；

2)将碳量子点CQDs-OH、4-氯-7-硝基苯-2-氧代-1,3-二唑NBD-Cl和反应溶剂混合均匀，加入酸受体，常温下反应24h后，加入乙酸乙酯超声分散，离心取固体，反复加入乙酸乙酯多次，直至离心所得上层液不显红色，将离心所得固体于60℃干燥，得双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD。

2.如权利要求1所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，步骤1)中，按固液比，对苯二酚:浓H₂SO₄＝1g:100μL。

3.如权利要求1所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，步骤2)中，所述反应溶剂选自乙醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈、二甲基亚砜或N,N-二甲基甲酰胺。

4.如权利要求1所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，步骤2)中，所述酸受体选自三乙胺、K₂CO₃或N,N-二异丙基乙胺。

5.如权利要求3或4所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，所述反应溶剂为N,N-二甲基甲酰胺，所述酸受体为N,N-二异丙基乙胺。

6.如权利要求1所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD，其特征在于，步骤2)中，按固液比，碳量子点:4-氯-7-硝基苯-2-氧代-1,3-二唑:N,N-二异丙基乙胺＝0.1mg:0.06mg:130μL。

7.权利要求1-6任一项所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD在定性和定量检测胎牛血清中Cys的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，方法如下：于含有生物硫醇的胎牛血清中，加入权利要求1-6任一项所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD的乙醇/PBS水溶液，混合均匀，在470nm波长光的激发下进行荧光检测。

9.权利要求1-6任一项所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD在定性检测生物细胞中生物硫醇或区分生物细胞中Cys/Hcy和GSH/NaSH中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，方法如下：于生物细胞中，加入权利要求1-6任一项所述的双激发双发射荧光探针CQDs-O-NBD的PBS水溶液，混合均匀，分别于蓝色通道和绿色通道进行荧光成像。