[发明专利]一种可靶向触发和自校准的适配体SERS传感器高精度检测人体血液中肿瘤标志物的方法

权利要求书

1.一种基可靶向触发和自校准的适配体SERS传感器高精度检测人体血液中肿瘤标志物的方法，其特征在于，利用可靶向触发和自校准的适配体SERS传感器，通过免疫方法捕获蛋白肿瘤标志物后测量拉曼标记分子的信号，实现对肿瘤标志物的高精度、高特异性SERS检测；所述适配体SERS传感器以46nm的银包金纳米粒子为核，外部卫星是20 nm的金纳米粒子，形成一种核卫星结构的SERS传感模型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是在于，核卫星纳米组件中间为嵌入内标分子（4MBN）的核壳纳米粒子，这是一种在1800 - 2300 cm^-1（静默区）有拉曼信号的标记分子，不会与生物分子的拉曼信号重叠，也可消除外部环境对SERS信号的影响，实现动态自校准，提高SERS检测的准确性。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述传感器的制备方法包括以下步骤：通过巯基将适配体修饰在核壳纳米粒子上，并加入PBS缓冲液调节pH值，缓慢搅拌，使其适配体DNA通过巯基与Au@4MBN@Ag结合形成Au@4MBN@Ag^@ADNA NPs，用PBS洗涤浓缩后重悬于PBS中；用同样的方法，将适配体的互补DNA链修饰在卫星Au纳米粒子上，形成Au^@CDNANPs；通过DNA的碱基互补配对，将Au@4MBN@Ag^@ADNA NPs与Au^@CDNANPs进行连接，形成核壳卫星结构的适配体SERS传感器模型。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，其中适配体为与前列腺抗原特异性结合的DNA单链，适配体的5'端修饰有巯基，使它易与贵金属纳米粒子结合，并在近5'端接上10个胸腺嘧啶，使适配体形成直链，避免贴于金属纳米粒子表面；根据适配体序列设计出互补的DNA单链，所述互补DNA单链的3'端上修饰拉曼报道分子Cy5，通过范德华力、氢键和静电相互作用形成稳定的目标-适配体复合物；

所述与前列腺抗原特异性结合的DNA单链序列为：

SH-(CH₂)₆-TTTTTTTTTTATTAAAGCTCGCCATCAAATAGCTGC；

所述互补的DNA单链序列为：

SH-(CH₂)₆-TTTTTTTTTTGCAGCTATTT-Cy5。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在DNA单链修饰纳米粒子之前，先将单链DNA活化；所述活化包括以下步骤：分别将与肿瘤标志物特异性结合的适配体10^-5 M DNA链和带有拉曼报道分子的互补DNA链放入到5 mM TCEP和Tris-HCl缓冲液的混合溶液中，所述DNA、TCEP和Tris-HCl缓冲液的体积比为1:1:1，活化巯基。