[发明专利]一种吡咯烷酮残留的检测方法

说明书

本发明提供一种吡咯烷酮残留的检测方法，所述方法包括：配制待测样品和标准品；使用高效液相色谱法，以无机溶液作为流动相，使用外标法来计算所述待测样品中吡咯烷酮的残留量。本发明所述的吡咯烷酮残留的检测方法操作简单、样品制备便捷、响应灵敏、分离度好，能够用于快速检测γ‑氨基丁酸中微量的吡咯烷酮残留，并为鉴别生物合成与化学合成的γ‑氨基丁酸提供技术手段。

技术领域

本发明涉及γ-氨基丁酸的检测领域，且更为具体地涉及一种吡咯烷酮残留的检测方法。

背景技术

在γ-氨基丁酸(4-Aminobutyric acid，简称GABA)又名4-氨基丁酸，γ-氨基丁酸是中枢神经系统中很重要的抑制性神经递质，它是一种天然存在的非蛋白组成氨基酸，具有极其重要的生理功能。γ-氨基丁酸因其具有健脑益智，抗癫痫，促进睡眠，美容润肤，调节免疫等功能被广泛应用于保健食品、医药等行业领域。

GABA的制备方法主要有化学合成法和生物合成法两种。发酵法通过筛选优良高产的安全菌种，发酵生产GABA制剂，利用乳酸菌、酵母菌、曲霉菌等一些安全性高的微生物生物合成GABA，产品安全性大幅提高。这就使得生物合成的GABA制品能用作高档功能性保健食品的配料，应用于保健食品、医药等行业领域。目前化学合成法主要由吡咯烷酮开环制得。将生石灰用蒸馏水消化成石灰乳，抽入水解反应釜，加吡咯烷酮，升温至125-130℃，反应压力保持在0.29MPa，保温反应10-14h以上。反应结束后降温至30℃出料过滤，用蒸馏水洗涤。滤液加碳酸氢铵，直至无钙离子检出，再加活性炭在80℃保温脱色30min，60℃过滤，用蒸馏水洗，洗液与滤液合并，在60℃减压浓缩至析出结晶，加入乙醇，冷却、过滤、干燥，得成品。因原料转化率的限制，化学合成法生产的GABA中常常含有大量吡咯烷酮残留，吡咯烷酮对皮肤有刺激作用，慢性作用可致中枢神经系统机能障碍，引起呼吸器官、肾脏、血管系统的病变，用于化妆品和食品中存在安全隐患。

目前，国家标准GBT 26602-2011(工业用2-吡咯烷酮标准)中规定的吡咯烷酮测定方法采用毛细管柱气相色谱法，但是该标准只涉及纯品2-吡咯烷酮以及纯品2-吡咯烷酮中杂质的检测，并没有涉及固体样品中2-吡咯烷酮残留的检测。有关吡咯烷酮类化合物残留的检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、液相色谱-质谱联用法。液相色谱-质谱联用检测，需使用质谱，检测成本高。现有技术中有液相检测吡咯烷酮的方法，然而多需使用大量的有机溶剂作为流动相，检测成本高且对试验操作者及环境具有一定毒性，如文献1(α-吡咯烷酮乙酰胺的HPLC测定，太原理工大学学报)中公开了一种吡咯烷酮类化合物(吡咯烷酮乙酰胺)的检测方法，色谱柱采用十八烷基硅烷键合相，流动相采用甲醇：乙腈：水(体积比5：2：3)的混合溶液，文献2(HPLC法测定轻工业产品中4种酮类物质的研究，针织工业)中公开了一种轻工业产品中吡咯烷酮类物质的检测方法，该方法使用Poroshell120EC-C18色谱柱，流动相为一定比例的乙腈和水的混合溶液。且文献2公开的方法虽然对2-吡咯烷酮的检测精度较高，但实际试验当中使用该方法时，2-吡咯烷酮与GABA的分离度无法达到要求，色谱峰重叠严重。

因此需要一种简便、快捷、准确度高的检测方法测定GABA中吡咯烷酮的残留，并为鉴别市面上生物合成与化学合成的GABA原料提供技术手段。

发明内容

针对现有技术存在的GABA中吡咯烷酮的残留检测方法的不足，本发明提供一种吡咯烷酮残留的检测方法。

具体来说，本发明涉及如下方面：

1、一种吡咯烷酮残留的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

配制待测样品和标准品；

使用高效液相色谱法，以无机溶液作为流动相，使用外标法来计算所述待测样品中吡咯烷酮的残留量。

2、根据项1所述的吡咯烷酮残留的检测方法，其特征在于，所述待测样品中包含γ-氨基丁酸。