[发明专利]一种防风草指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开了一种防风草指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，属于中药材的指纹图谱技术领域，包括对照品溶液的制备：称取10组不同部位和地域的防风草标准样品，加入乙醇溶解并定容，制成对照品溶液；供试品溶液的制备：称取1g防风草粉碎样品，置于试管中，加入10ml乙醇，摇匀后浸泡1小时，再次摇匀后过滤，滤液作为供试品溶液；高效液相色谱检测：吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录60min内的指纹图谱；通过该方法可获得防风草的标准指纹图谱，比较指纹图谱中主要峰的有无和数据，能有效地鉴别防风草的质量、产地及真伪，用于反映防风草质量的优劣，为防风草质量的全面、有效控制提供了理论和实践基础。

技术领域

本发明属于中药材的指纹图谱技术领域，具体涉及一种防风草指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

背景技术

防风草(Fang Feng Cao)是我国西南、东南、长江以南及西藏东南部常见的直立草本药用植物，在甘肃天水、陇南、陕西汉中及四川西南部等有野生及种植。早在清代《生草药性备要》中就有防风草药用价值的记载，实验研究证实，防风草内酯是防风草的重要活性成分。防风草具有辛、苦、微温，全草入药，具有祛风解表，理气止痛的功效。

目前，防风草已广泛用于治疗风湿感冒、急性肠炎等，如广防风颗粒；同时，在临床应用上，与防风草相关的中成药有广防风胶囊，主治女性更年期综合症，能明显改善肾阴虚证围绝经期综合征的中医证候，如：潮热汗出、心烦易怒、失眠多梦、腰膝酸痛、头晕、耳鸣、口干、性欲下降、阴道干涩、大便干结等，安全可靠，无毒副作用；此外，还有用白背叶、防风草治疗流行性腮腺炎，毛稔汤(毛稔、防风草)治疗滴虫性阴道炎，防风草有抗Ⅰ型单纯疱疹病毒型作用等记载；再者，防风草的大环二萜类化合物(防风草内酯)具细胞毒性，有抑制KB细胞生长的作用和降压作用；此外，防风草根、叶或花的粗提取物、挥发油以及纯的黄酮和萜类均具有明显的抗菌、抗癌、抗炎、抗HIV、镇痛、抗病毒、抗血小板聚集等活性，以及防治神经退行性疾病的功效。

但目前尚无防风草药材的质量标准，对防风草药材质量的控制非常薄弱，只包括植物性状与粉末显微方面的常规性检查，缺乏完善的质量评价体系，难以达到对防风草质量的有效控制。

发明内容

本发明的目的在于，针对上述问题，提供了一种防风草指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，利用该图谱可监控防风草药材的质量、产地及真伪鉴别。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种防风草指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：

S1：对照品溶液的制备：称取10组不同部位和地域的防风草标准样品，加入乙醇溶解并定容至质量为0.95～1.05g，摇匀，制成对照品溶液；

S2：供试品溶液的制备：称取防风草粉碎样品0.95～1.05g，置于试管中，加入9～11ml乙醇，摇匀后浸泡1小时，再次摇匀后采用微孔滤膜进行过滤，滤液作为供试品溶液；

S3：高效液相色谱检测：吸取步骤S2中所得的供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录60min内的指纹图谱；

其中，指纹色谱条件为：

采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，4.6×250mm，5um，检测波长为210～220nm，流速为0.8mL/min，进样量为5uL，柱温为20℃～35℃，流动相A为甲醇，流动相B为0.1％甲酸溶液，采用梯度洗脱条件为：

0min时，流动相A：流动相B＝10:90；

5min时，流动相A：流动相B＝10:90；

40min时，流动相A：流动相B＝90:10；

50min时，流动相A：流动相B＝90:10；

50.1min时，流动相A：流动相B＝10:90；