[发明专利]一类基于阿片肽和大麻肽的双功能肽及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一类基于阿片肽和大麻肽的双功能肽及其制备方法与应用，基于阿片肽DALDA的N端序列与大麻肽(m)VD‑Hpα‑NHsubgt;2/subgt;的C端序列构建而成的全新双功能肽。与现有技术相比，本发明中OCP 001和OCP 002在体内的镇痛活性有所加强，产生了比母体分子更有效的镇痛效果，且解决了阿片和大麻类激动剂以及母体分子存在的镇痛耐受的问题，产生了无耐受形式的镇痛效果，可用于急性痛和病理性疼痛的治疗。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一类基于阿片肽DALDA和大麻肽(m)VD-Hpα-NH₂的双功能肽及其制备方法与应用。

背景技术

疼痛是临床患者最常见的主诉之一，全球有超过10亿人口长期遭受慢性疼痛的折磨。目前，阿片药物是急、慢性中至重度疼痛治疗的首选用药，然而其在使用过程中伴随的副作用严重影响了患者的用药依从性和生活质量。近年来，肽类镇痛分子因其较高的生物活性和较低的免疫原性，已成为新药研发的热点方向之一。DALDA是一种皮啡肽的四肽衍生物，表现为MOR的选择性激动剂(J Pharmacol Exp Ther 2001,298：57)。DALDA因其较强的分子带电性，通常不易穿过血脑屏障，在一系列临床前痛觉模型中产生显著的镇痛作用。然而，其在有效镇痛剂量下仍存在镇痛耐受、呼吸抑制和运动增强等阿片样副作用(Eur JPharm Sci 2016,93：11；J Pharmacol Exp Ther 2001,297：364)。因此，开发镇痛活性好、副作用低的镇痛分子是目前亟待解决的关键科学问题。

大麻类镇痛分子因其镇痛谱广、躯体依赖性低等优势，有望取代传统的阿片疗法。大麻在体内主要有两个作用靶点，分别为大麻CB1和CB2受体。其中，CB1受体在与痛觉传导相关的区域大量表达，如基底神经节、大脑皮层、脊髓背角和背根神经节(Curr MolPharmacol 2019,12：239)。相比之下，CB2受体的分布相对保守，主要表达在外周与免疫功能相关的组织和细胞中，如脾脏、扁桃体、胸腺、巨噬细胞和白细胞等(Curr Mol Pharmacol2019,12：239)。激活体内的CB1和CB2受体可显著抑制痛觉信号通路。

Hemopressin(Hp)是一种来源于血红素α链的九肽衍生物，表现为CB1受体的拮抗剂/反向激动剂。在之后的研究中，Gomes等人在小鼠脑匀浆中分离鉴定了hemopressin的N-端延长肽(m)VD-Hpα和(m)RVD-Hpα，以及来源于血红素β链的十二肽衍生物(m)VD-Hpβ。其中，(m)VD-Hpα表现为CB1受体的选择性激动剂(FASEB J 2009,23：3020)，在一系列临床前痛觉模型中均能产生高效的镇痛活性，但在有效镇痛剂量下仍存在耐受、体温降低和运动抑制等大麻样副作用(Brain Res Bull 2018,139：48；Brain Res 2018,1680：155；JPharmacol Exp Ther 2014,348：316)。随后，通过对(m)VD-Hpα的构效关系进行研究，发现其C-末端酰胺化类似物(m)VD-Hpα-NH₂的镇痛活性相对于母体分子明显增强，且有效镇痛剂量下无僵直、运动抑制、便秘、镇静、促摄食和运动失调等大麻样副作用产生(Neuropharmacology 2020,175：108178)。然而，与经典的大麻激动剂一样，侧脑室连续注射(m)VD-Hpα-NH₂仍产生明显的镇痛耐受现象。