[发明专利]一种拮抗烟草疫霉菌的生防菌菌株及其菌剂的田间扩繁方法和应用

说明书

本发明涉及一种拮抗烟草疫霉菌的生防菌菌株及其菌剂的田间扩繁方法和应用，属微生物菌剂的应用技术领域。本发明的一株拮抗烟草疫霉菌的生防菌菌株，该菌株为拮抗烟草疫霉菌的生防菌；保藏名称为长枝木霉PE02TrichodermalongibrachiatumPE02；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉武汉大学；保藏日期：2020年12月12日；保藏编号:CCTCCNO.M2020784。本发明的微生物可用于制备微生物农药和微生物肥料。PE02菌株在制备用于防治烟草黑胫病的菌剂中的应用。利用PE02菌株制备的菌剂经本发明的田间扩繁方法发酵后在防治烟草黑胫病中的应用。本发明的有益效果在于：利用PE02菌株制备的菌剂经田间扩繁后能高效防治烟草黑胫病，降低使用成本、防效高、无残留、对人畜安全的特点。

技术领域：

本发明涉及微生物菌剂的应用技术领域，具体涉及一种拮抗烟草疫霉菌的生防菌菌株及其菌剂的田间扩繁方法和应用。

背景技术：

木霉属(Trichoderma)真菌的许多种类为菌寄生菌，可寄生至少18个属29种病原真菌，是防治植物真菌病害常用的生防菌，在生物农药、微生物菌剂产品开发中广泛应用。木霉菌拮抗病原真菌的主要机制包括：竞争作用、重寄生作用、抗生作用和诱导宿主抗性等(胡娴等，2019)。此外，木霉菌还具有适应性强、增殖力强、养分利用率高、改良根际能力强、促进植物生长效果好等特点，在土壤修复、病害防治、促进植物生长等方面均得到广泛应用。

木霉菌在多种植物病害防控方面已表现良好的应用前景。张丽荣等(2018)从不同作物根际土壤分离得到22株木霉，出6株对西瓜枯萎病菌(Fusarium)具有较强拮抗能力，抑菌率在76.92％以上。彭阁等(2018)从植烟土壤中筛选的里氏木霉(T.reesei)ZP2-1菌株对烟草黑胫病对烟草黑胫病田间防治效果达59.50％。徐沛东等(2017)报道用棘孢木霉菌(T.asperellum)做成的可湿性粉剂对辣椒疫病防效高于化学农药50％烯酰吗啉。常媛等(2017)在园林植物八宝景天根际土壤中分离得到一株长枝木霉(T.longibrachiatum)T1-70，对核盘菌的抑菌率最高为77.71％。刘佳等(2020)报道长枝木霉T6菌株对美洲南瓜枯萎病的室内盆栽防效为69.06％。然而，“防效不高、防效不稳、使用成本高”仍然是制约木霉菌剂产业化推广应用亟待解决的难题。究其原因，主要包括：(1)目前市场上的木霉菌剂的主效成分为分生孢子，尽管分生孢子容易通过液体发酵大量生产，但贮存时间短，产孢活性不高(李秀明等，2013)。(2)目前木霉菌剂的常规田间使用量1-3公斤/亩，稀释到20厘米左右的耕作层土壤中可谓沧海一粟，加之受土壤理化性质、土壤微生物的营养竞争与空间竞争等因素的影响，木霉菌很难在土壤中占优势种群，其防效可想而知。(3)木霉菌剂孢子含量在5亿/克的产品平均价格在70元/公斤左右，在不能保证防效的情况下此成本目前很难被用户接受。

烟草黑胫病是由烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)侵染引起，是烤烟种植中的头号病害。本发明人在研究烟草黑胫病的生物防治中，筛选到一株长枝木霉PE02菌株，该菌株能高效拮抗烟草疫霉菌的生防菌，极具应用价值。本发明针对木霉菌剂“防效不高、防效不稳、使用成本高”的现有技术难题，提供一种长枝木霉田间简易扩繁方法及防控烟草黑胫病的技术。

发明内容

本发明的目的在于克服现有木霉菌剂技术之不足，而提供一种对人畜安全的拮抗烟草疫霉菌的生防菌菌株及其菌剂的田间扩繁方法和应用。

为了解决现有技术的问题，本发明提供了如下技术方案：本发明的以烟草疫霉菌为靶标，采用生防真菌传统分离筛选方法，从采自云南省普洱市宁洱县的植烟土壤中获得了一株长枝木霉T.longibrachiatumPE02菌株，该菌株对烟草疫霉菌的菌丝生长有较强的拮抗性。该菌株为拮抗烟草疫霉菌的生防菌；保藏名称为长枝木霉PE02(Trichodermalongibrachiatum PE02)；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉武汉大学；保藏日期：2020年12月12日；保藏编号:CCTCC NO.M 2020784。