[发明专利]一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法

说明书

本发明公开了一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS‑PAGE鉴别的前处理方法，包含以下步骤：用含钠离子的溶液将含油敷料稀释成重组胶原蛋白浓度为1mg/ml～2mg/ml的溶液；充分混合后静置30分钟；以1200rpm离心10分钟后取中层澄清透明液体转移至离心管；经SDS‑聚丙烯酰氨凝胶电泳法，样品的电泳条带与重组胶原蛋白对照品进行比较，其电泳条带一致。本发明的含油敷料中重组胶原蛋白SDS‑PAGE鉴别的前处理方法，用含钠离子的溶液将含油敷料稀释，在破坏大分子增稠剂的同时不对重组胶原蛋白结构和性状造成影响，且操作简单安全，重复性较好。

技术领域

本发明涉及一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，适用于医药和化妆品领域。

背景技术

近年来，随着技术革新和人民生活水平的提高，传统美容项目已经不能满足人们对美的渴望与追求，医疗美容的种类和数量呈跨越式增长的同时，医疗美容后的修护护理也备受关注。重组胶原蛋白来自于酵母发酵产物，非动物来源，具有与人体胶原序列相似度高，活性好，促进细胞生长和修复皮肤屏障的特点。

油类原料在敷料中可以起到润肤作用，对于皮肤屏障的修复至关重要，然而油相的加入对增稠剂的悬浮乳化能力则具有较高要求。根据国家食品药品监督管理总局网站公布的医疗器械信息，并未有以重组胶原蛋白为主的含油敷料公布，因此尚未有相应的检验方法可供参考。

当敷料中含有油相成分时，需要使用大分子增稠剂稳定体系，这样即使敷料经过稀释后，重组胶原蛋白仍然与增稠剂物理性结合，造成常规手段难以鉴别的情况。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，适用于含油敷料中重组胶原蛋白的鉴别，在破坏大分子增稠剂的同时不对重组胶原蛋白结构和性状造成影响，且操作简单安全，重复性较好，用于配合医疗器械申报过程中的检验工作。

实现上述目的的技术方案是：一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，包括以下步骤：

S1，用含钠离子的溶液将含油敷料稀释成重组胶原蛋白浓度为1mg/ml～2mg/ml的溶液；

S2，充分混合后静置30分钟；

S3，以1200rpm离心10分钟后取中层澄清透明液体转移至离心管；

S4，经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳法，分离胶浓度为12％，步骤S3得到的离心管中的液体和上样缓冲液的混合物形成样品；样品的加样量为20μl，样品的电泳条带与重组胶原蛋白对照品进行比较，其电泳条带一致。

上述的一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，其中，所述的含油敷料中含有增稠剂，所述增稠剂为卡波姆、丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物和聚丙烯酸钠中的一种或多种。

上述的一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，其中，所述含钠离子的溶液采用质量分数0.9％的氯化钠溶液、质量分数1％的碳酸钠溶液或质量分数1％的磷酸氢二钠溶液。

本发明的含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，用含钠离子的溶液将含油敷料稀释，在破坏大分子增稠剂的同时不对重组胶原蛋白结构和性状造成影响，且操作简单安全，重复性较好。

附图说明

图1为本发明的含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法的SDS-PAGE测试结果对比图。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图对其具体实施方式进行详细地说明：

实施例1：

一种含油敷料中重组胶原蛋白SDS-PAGE鉴别的前处理方法，包括以下步骤：