[发明专利]用于诊断抗gp210抗体阳性与阴性PBC患者的糖链标志物及其用途

说明书

本发明通过采用含有56种凝集素的凝集素芯片检测PBC中抗gp210抗体阳性患者与阴性患者血清IgG与凝集素特异性结合的聚糖差异。结果显示，与阴性患者相比，BPL凝集素结合聚糖的含量在抗gp210抗体阳性患者中是升高的。由于BPL凝集素是特异性结合半乳糖，这表明半乳糖水平在抗gp210抗体阳性患者中的表达是升高的。凝集素免疫印迹验证结果也表明BPL凝集素结合聚糖的含量在抗gp210抗体阳性患者中依然是升高的。可见，BPL凝集素与IgG结合所形成的复合物可作为用于诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的糖链标志物。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用于诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的糖链标志物及其用途。

背景技术

原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis，PBC)，以前称为原发性胆汁性肝硬化，是一种罕见的进行性肝内胆汁淤积性自身免疫疾病，其特征是肝小胆管逐渐受到破坏，可发展为肝纤维化，肝硬化，肝功能衰竭。抗线粒体抗体(AMA)是PBC的血清学标志。除AMA以外，大约50％的PBC患者和85％的AMA阴性PBC患者应发现ANAs(抗核抗体)的血清浓度升高。GP210是一种I型整合膜蛋白。抗gp210抗体是抗核抗体(ANA)的亚型(核膜型)，靶抗原是核孔复合物上的相对分子质量为210 000的跨膜糖蛋白。抗gp210抗体在PBC患者中的阳性率大约为l0％～40％，其对PBC诊断的特异性高达99％，是胆汁淤积和肝衰竭的危险因素。PBC患者gp210在小胆管上皮细胞的表达增加与小胆管炎性损伤相关，由此产生的自身免疫反应可能导致疾病向终末期发展。一些研究发现，抗gp210阳性与较高的血清胆汁淤积参数有关，并可以作为预后不良的指标。与抗gp210抗体阴性的患者比较，抗gp210抗体阳性的患者胆汁淤积更为严重、预后更差。

IgG是人体内含量最丰富的抗体。它参与多种体液免疫过程：抗原中和、补体激活和补体依赖性细胞毒(CDC)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)和超敏反应。多糖是由多达15个单糖残基组成的复杂低聚糖，约占IgG重量的15％，是IgG不可分割的部分，它组成的变化会影响IgG的结构稳定性、构象和半衰期，以及它的效应器功能。事实上，如果多糖完全去除会导致IgG促炎活性和抗炎活性的丧失。自从在类风湿性关节炎患者中发现IgG糖基化异常改变后，已有越来越多的证据表明IgG糖基化在自身免疫性疾病中发挥着重要的作用。本研究通过高通量的糖基化分析技术——凝集素微阵列技术来检测抗gp210抗体阳性患者与阴性患者血清IgG糖基化修饰差异，以期探讨糖基化两者在PBC中的临床应用价值。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种用于诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的糖链标志物及其用途。

首先，本发明提供一种用于诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的糖链标志物，其为BPL凝集素与IgG结合所形成的复合物。

其中，所述的IgG含有半乳糖。

其次，本发明还提供所述糖链标志物在用于制备诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的试剂中的用途。

具体地，所述诊断包括：测定待测的生物样品中BPL凝集素与IgG结合所形成的复合物水平；任选地，

与对照数据比较所述生物样品中BPL凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中BPL凝集素与IgG结合所形成的复合物的水平可检测地升高表明生物样品来自PBC抗gp210抗体阳性的可能性。

其中，所述生物样品为血清样品。

本发明还提供BPL凝集素在制备用于诊断抗gp210抗体阳性PBC患者与抗gp210抗体阴性PBC患者的试剂中的用途。