[发明专利]一种基于拉曼光谱实时监测中药配方颗粒提取过程的方法

权利要求书

1.一种基于拉曼光谱实时监测中药配方颗粒提取过程的方法，所述中药为甘草，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)甘草配方颗粒提取过程的取样

将甘草饮片加水浸泡，浸泡完成后收集第一个样本，接着升温至沸腾进行提取，在提取过程中每隔10min收集一次样本；

取样重复5个批次，每批可以收集得到15个样品，共得到75份样品；

(2)拉曼光谱采集过程

利用便携式拉曼光谱仪实时采集步骤(1)所得样本的拉曼光谱；

(3)液相分析过程

利用高效液相色谱测定步骤(1)所得样本中甘草苷和甘草酸含量实际值；

(4)含量预测模型的建立

将步骤(2)采集得到的拉曼光谱与步骤(3)液相色谱结果对应，通过考察不同光谱预处理方法对模型的影响，选出最优光谱变量筛选方法，评估定量模型的性能参数，分别建立甘草苷和甘草酸含量预测模型；

样本通过Kennard-Stone算法以7：3的比例划分校正集与预测集，其中：校正集52个样本，预测集23个样本；

光谱预处理方法包括：SG平滑、一阶导数、二阶导数、MSC、SNV；

光谱变量筛选方法包括：CARS、SPA、MC-UVE、siPLS；

建立的定量模型包括PLSR模型、BRR模型；

评估模型性能是通过使用四个评价指标考察模型性能，包括：R²_cv、RMSECV、R²_P、RMSEP；R²_cv和R²_P越接近1，RMSECV和RMSEP越小，模型的准确度和预测能力越好；

(5)实际提取过程中的实时监测

实时采集待测甘草配方颗粒提取过程中样品的拉曼光谱，将采集得到的拉曼光谱信息代入步骤(4)所建立的模型中，即可获得待测样品中甘草苷和甘草酸的含量。

2.如权利要求1所述基于拉曼光谱实时监测中药配方颗粒提取过程的方法，其特征在于，步骤(1)的操作为：将甘草饮片加7倍量水浸泡30min，浸泡完成后收集第一个样本，接着升温至沸腾进行第一次提取，在沸腾初始收集第二个样本，之后每隔10min收集一次样本，第一次提取的时间为90min，第一次提取完成后分离提取液，剩余物加水升温至沸腾进行第二次提取，第二次提取的加水量为甘草饮片的6倍，第二次提取的时间为30min，在第二次提取过程中同样每隔10min收集一次样本，第二次提取完成后分离提取液，最后对第一次、第二次提取分离所得提取液的混合液收集一次样本。

3.如权利要求1所述基于拉曼光谱实时监测中药配方颗粒提取过程的方法，其特征在于，步骤(2)中，便携式拉曼光谱仪采集样本光谱的参数为：拉曼光谱光源的激发波长为785nm，激光强度为100％，激光功率为300mW，积分时间为10s，采集3次取平均，总采集时间30s，拉曼位移的光谱范围为201.33～3100cm^-1。

4.如权利要求1所述基于拉曼光谱实时监测中药配方颗粒提取过程的方法，其特征在于，步骤(3)中，高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZorBax SB C₁₈；柱温25℃；流速1.0mL·min^-1；检测波长237nm；进样量10μL；乙腈为流动相A，0.05％磷酸水为流动相B；梯度洗脱程序为：

高效液相色谱测定法为：对甘草苷和甘草酸进行线性范围考察，计算甘草苷和甘草酸线性回归方程及范围；精密移取样本1mL，以13000r/min速度离心5min，上清液过0.22μm微孔滤膜，取续滤液液相分析，记录色谱图峰面积，代入线性回归方程算得样本中甘草苷和甘草酸含量实际值。