[发明专利]一种测定氨基酸类药物中两种氯代烷基因毒杂质的方法

说明书

本发明公布了一种气相质谱联用分析仪测定一种氨基酸类化学原料药中氯代叔丁烷和1‑氯丁烷两种基因毒杂质的方法，目的在于严格控制该类化学原料药中可能存在的氯代叔丁烷和1‑氯丁烷这两种基因毒杂质，所采用的气相质谱联用分析仪检测灵敏度高，检测结果准确可靠，严格监测原料中这两种基因毒杂质的含量，以提高药物制剂的安全性。开发的检测方法如下：采用气质联用色谱仪，DB‑624毛细管气相色谱柱，采用程序升温，以顶空进样的方式，选择SIM模式，采集m/z＝43作为氯代叔丁烷定量离子，m/z＝77作为1‑氯丁烷定量离子，以对照品外标法对供试品中这两种基因毒性杂质进行定量检测。本发明检测快速，灵敏度高，准确度好，检测结果准确可靠。

技术领域

本发明涉及一种用气相质谱联用分析仪测定一种氨基酸类化学原料药中氯代叔丁烷和1-氯丁烷这两种基因毒杂质的检测方法，适用于该氨基酸类化学原料药或其他类似化合物中这两种基因毒性杂质的定量分析，属于药物分析技术领域。

背景技术

该氨基酸类化学原料药为一种新型抗肿瘤化合物，药物经口服或注射等方法引入体内，选择性的聚集在癌细胞中，经外部中子照射病变部位，药物发生细胞内核反应，利用由此产生的α例子和⁷Li离子在细胞范围内杀死癌细胞，达到抗肿瘤疗效。临床实验结果表明该氨基酸类化学原料药用于治疗脑胶质瘤和黑色素瘤的疗效确切，有希望成为治疗肿瘤的新型药物。

该氨基酸类化学原料药未被国内外药典收载，为化学合成，合成路线较为复杂，须使用多种有机试剂及催化剂，因反应过程中会使用盐酸、格氏试剂(含叔丁基氯化镁)，推测可能会生成氯代叔丁烷和1-氯丁烷这两种有基因毒性的杂质，根据最大日服剂量计算得出这两种杂质的限度分别为2μg/g，限度较低，常规气相检测方法无法满足灵敏度需求，因此开发了检测灵敏度更高的气相质谱联用仪进行定量检测的方法，以便于严格的监测该类化学原料药物中这两种基因毒性杂质的含量，以便于提高该类药物制剂的安全性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用气相质谱联用仪测定一种氨基酸类化学原料药中氯代叔丁烷和1-氯丁烷这两种基因毒杂质的检测方法，本方法灵敏度高、准确度高、重现性好。

本发明的测定方法如下步骤所示：

(1)供试品溶液的制备：取本氨基酸类化学原料药约0.1g，精密称定，置20ml顶空瓶中，加二甲基亚砜2ml，摇匀，密封，超声，作为供试品溶液。

(2)对照品溶液的制备：称取氯代叔丁烷和1-氯丁烷对照品适量，加二甲基亚砜溶解并定量稀释成每1ml中含氯代叔丁烷和1-氯丁烷分别为0.1μg的混合溶液，量取该混合溶液2ml置20ml顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。

(3)色谱条件

仪器：气相质谱联用分析仪，检测器为单重四极杆检测器；

色谱柱：DB-624毛细管色谱柱(30m*0.32mm*1.8μm)；

升温程序：40℃保持10min，40℃/min升温至240℃保持3min；

流速：2ml/min；

MS Sourse：250℃；

MS Quad：150℃；

SIM模式：m/z＝43(氯代叔丁烷定量离子)，77(1-氯丁烷定量离子)；

Gian factor：1.00；

采集时间范围：0～12min；

进样口温度及分流比：200℃，2∶1；

顶空平衡温度及时间：90℃，30min；

定量阀温度：100℃；

传输线温度：110℃；

进样量：1ml；

气相循环时间：25min

进样时间：1min

(4)样品检测