[发明专利]一种基于g-C3

权利要求书

1.一种基于g-C₃N₄-Au NFs和ZnO@PDA-CuO之间的共振能量转移检测降钙素原的电化学发光传感器的制备及应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用Al₂O₃抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极，超纯水清洗干净，将6 µL、0.25~2.5 mgmL^-1 的g-C₃N₄-Au NFs-Ab₁标记物溶液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；

（2）滴加3 µL、质量分数为0.1%的BSA溶液到电极表面，用超纯水洗净，室温下晾干；

（3）滴加6 µL、0.00005~50 ng mL^-1的一系列不同浓度的降钙素原抗原到电极表面，孵化2 h，超纯水冲洗，室温下晾干；

（4）滴加6 µL的聚多巴胺包裹的ZnO负载小尺寸CuO的降钙素原识别抗体的二抗标记物ZnO@PDA-CuO-Ab₂溶液，超纯水冲洗，室温下晾干，制得一种电化学发光传感器。

2.如权利要求1所述的一种基于g-C₃N₄-Au NFs和ZnO@PDA-CuO之间的共振能量转移检测降钙素原的电化学发光传感器的制备及应用，其特征在于，所述的花状Au纳米颗粒修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-Au NFs并结合降钙素原识别抗体的一抗标记物g-C₃N₄-Au NFs-Ab₁溶液的制备步骤如下：

（1）片状g-C₃N₄的制备

将5 g三聚氰胺放入带盖的陶瓷坩埚中，在550℃下煅烧4 h，得到2 g黄色粉末，然后溶解于100 mL 5 moL L^-1 HNO₃中超声2 h，在125℃下回流24 h，然后，将回流的产物8000 rmin^-1的转速离心并用超纯水洗涤直至pH接近7，将产物在55℃真空烘箱中干燥12 h，将所得固体粉末分散于水中，超声剥离24 h，保留上层液，旋蒸浓缩，得到片状g-C₃N₄；

（2）聚吡咯包裹金纳米花修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-Au NFs的制备

将0.4236 g吡咯溶解于20 mL乙醇/水( 1:1 )溶液中，加入200 mL 0.01% HAuCl₄溶液，在30℃水浴中搅拌2小时，13000 r min^-1转速下离心10 min，用去离子水洗涤3次后，分散于20 mL水溶液中，即得到Au NFs @ppy水溶液，取3 g L^-1的g-C₃N₄溶液5 mL，超声分散1 h，在搅拌均匀的情况下加入5 mL Au NFs@ppy水溶液，并搅拌过夜使其充分反应，将反应液以8000 r min^-1的转速离心，并用去离子水洗涤3次，将产物在55℃真空烘箱中干燥12 h，即得到g-C₃N₄-Au NFs；

（3）g-C₃N₄-Au NFs结合降钙素原识别抗体的一抗标记物g-C₃N₄-Au NFs-Ab₁溶液的制备

将1~5 µg mL^-1的降钙素原捕获抗体的一抗标记物在4℃下使用EDC、NHS进行活化，然后与g-C₃N₄-Au NFs共同孵化6 h，得到g-C₃N₄-Au NFs-Ab₁标记物溶液。