[发明专利]一种人源肿瘤异种移植模型构建方法及其应用

说明书

本发明涉及一种人源肿瘤异种移植模型构建方法及其应用。本发明提供了基于IL2RG基因敲除免疫缺陷叙利亚仓鼠的人源肿瘤异种移植模型构建方法，通过移植患者自身的肿瘤细胞或组织，成功建立个性化的人源化叙利亚仓鼠肿瘤异种移植模型。该方法成瘤率高、成瘤时间短且能够获得较多的人源肿瘤样本。构建得到的人源肿瘤异种移植模型保留了原代肿瘤的基质异质性、组织学特性、分子多样性以及微环境，可以广泛应用于临床前药效个性化筛选评估以及生物标志物的鉴定等方面，为肿瘤基础研究及药物评价奠定基础。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种人源肿瘤异种移植模型构建方法及其应用。

背景技术

恶性肿瘤是威胁人类健康安全的疾病之一，肿瘤发病率和死亡率高，有效的临床治疗效率目前仍然偏低。随着对肿瘤分子生物学、基因组学研究的不断深入，人类对肿瘤异质性的特点有更全面的认识。基因组测序研究发现，相同病理类型的肿瘤之间基因突变重复很少；相同类型肿瘤的不同个体之间的基因突变谱差异很大，这是造成相同病理类型肿瘤具有不同临床表型的生物学基础，也是同类型肿瘤的不同个体对相同治疗反应很不一样的原因，因此个体化治疗已经成为肿瘤临床治疗的发展方向和最有效的手段。个体化治疗致力于寻找可预测特异性治疗应答的疾病特征以改善个体化治疗效果，因此建立个性化的肿瘤治疗模型是一种简便而直接的手段。

肿瘤动物模型的建立是研究致瘤机制、抗肿瘤药物检测和肿瘤分子生物学极其重要的手段。非人灵长类动物由于数量有限、成本高、操作不便和伦理限制等原因，临床试验有限。小鼠是常用的实验动物模型。然而，不同类型的免疫缺陷小鼠建立人源肿瘤异种移植模型存在植入成功率低、成瘤时间长、小鼠血量少和获得肿瘤组织不足等问题，严重阻碍了对肿瘤基础研究及药物评价。

发明内容

本发明的目的在于提供了人源肿瘤异种移植模型构建方法，该方法基于IL2RG基因敲除免疫缺陷叙利亚仓鼠建立人源肿瘤异种移植模型，成瘤率高、建模周期短。

本发明的第二个目的在于提供上述人源肿瘤异种移植模型的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种人源肿瘤异种移植模型构建方法，包括将人源肿瘤细胞或组织皮下移植于IL2RG基因敲除免疫缺陷叙利亚仓鼠。

优选的，所述构建方法包括如下步骤：

1)在无菌条件下切取临床肿瘤组织块，清洗后将肿瘤组织块分割成体积均为3-5mm³的接种肿瘤块；

2)取雄性或雌性IL2RG基因敲除叙利亚仓鼠，将步骤1)的接种肿瘤组织块接种于IL2RG基因敲除叙利亚仓鼠前肢侧背部皮下；

3)饲养步骤2)得到的接种人源肿瘤细胞或组织的IL2RG基因敲除免疫缺陷叙利亚仓鼠，得到人源肿瘤异种移植模型。

优选的，步骤1)中的临床肿瘤组织块为实体瘤或非实体瘤组织。

优选的，步骤1)中的临床肿瘤组织块为肺癌、食管癌和淋巴瘤中的任一种。

优选的，步骤2)中肿瘤块还可接种于IL2RG基因敲除叙利亚仓鼠的前肢下侧腹部。

优选的，步骤3)中饲养接种人源肿瘤细胞或组织的IL2RG基因敲除免疫缺陷叙利亚仓鼠的时间为15-60天。

本发明还提供了上述人源肿瘤异种移植模型构建方法在提高建模成功率和/或缩短建模周期中的应用。

本发明提供了上述的人源肿瘤异种移植模型构建方法在肿瘤基础研究中的应用。

本发明提供了上述的人源肿瘤异种移植模型构建方法在抗肿瘤药物的临床前药效评价中的应用。

本发明取得的有益效果：