[发明专利]一种硫酸盐还原菌对硝化纤维素脱硝的应用

权利要求书

1.一种硫酸盐还原菌在硝化纤维素脱硝上的应用，其特征在于，所述硫酸盐还原菌为硫酸盐还原菌（Desulfosporosinus meridiei）13257，保藏于美国菌种保藏中心，保藏编号为ATCC NO.BAA-275；所述应用包括以下步骤：

步骤1，配制厌氧菌培养基

按以下质量称取各组分葡萄糖1.0g/L、酵母粉2.5g/L、蛋白胨7.5g/L、肉浸膏15.0g/L、酸水解酪素2.5g/L、NaCl 5.0g/L，并将各组分混合，再加入1 %刃天青作为氧气指示剂、2.5 % L-半胱氨酸盐还原剂，搅拌均匀，115℃下高温高压蒸汽灭菌20min，即得厌氧菌培养基；

步骤2，无菌环境下，向厌氧瓶中加入培养液，密封后转入厌氧箱中，备用；培养液的接入量不超过厌氧瓶容量的一半；

步骤3，在厌氧箱中对厌氧瓶进行除氧，直至氧气指示剂刃天青变成无色，按照10 %的接种量将菌株DSM 13257接种至厌氧瓶中，转入培养箱中培养至OD₆₀₀为0.6-0.8时，备用；

步骤4，在厌氧箱中，将底物4g/L硝化棉加入培养液中与菌株共同培养；

步骤5，培养完成后，将培养液在8000rpm下离心，取沉淀，并用超纯水与1 M NaCl溶液分别对沉淀进行洗涤，重复洗涤三次；洗涤完成后，8000rpm离心取沉淀，并按照1g沉淀物加入40mL丙酮的比例，向沉淀中加入丙酮溶液，40℃溶解2 h，离心取上清；再向上清中滴加由水与乙醇按照体积比为2：1进行混合的溶液，直至硝化纤维素不再析出；将析出的硝化纤维素烘干，称重，计算损失率，并进行N含量的分析。

2.根据权利要求1所述的一种硫酸盐还原菌在硝化纤维素脱硝上的应用，其特征在于，步骤4中共培养时，添加小分子氮源酸水解酪素。

3.根据权利要求1所述的一种硫酸盐还原菌在硝化纤维素脱硝上的应用，其特征在于，步骤4中共培养的温度为37℃，体系pH 为7.0-7.5。