[发明专利]一种用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列及其制备方法在审
申请号: | 202110073725.3 | 申请日: | 2021-01-20 |
公开(公告)号: | CN112813016A | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 赵远锦;雷昕;石亮;施可庆;邵长敏;王月桐 | 申请(专利权)人: | 温州医科大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C08F299/02;C08J9/00;C08L55/00 |
代理公司: | 南京钟山专利代理有限公司 32252 | 代理人: | 蒋厦 |
地址: | 325000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 三维 细胞 球体 生成 多孔 凝胶 阵列 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备多孔水凝胶阵列:将水凝胶原溶液填充入带有微柱的模板里,固化;待水凝胶原溶液固化后从模板上剥离,得到多孔水凝胶阵列;
(2)制备尺寸均一的三维细胞球体:将步骤(1)制备的多孔水凝胶阵列经紫外消毒过后放入细胞培养板中,加入一定数量的细胞悬液及培养基,通过重力作用,细胞落进多孔内并在一定时间内聚集形成尺寸均一的三维细胞球体。
2.根据权利要求1所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的水凝胶原溶液采用聚乙二醇二丙烯酸酯,所述多孔水凝胶阵列由PDMS模板复制而成。
3.根据权利要求2所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:所述水凝胶原溶液在固化之前需要避光放置,所述PDMS模板内微柱的直径为200μm,微柱的高度为200μm。
4.根据权利要求1所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:所述多孔水凝胶阵列的微孔的列数和排数均大于5,微孔直径为200μm,深度为200μm。
5.根据权利要求1所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述水凝胶原溶液通过抽真空的方式充分填充入PDMS模板内。
6.根据权利要求1所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述水凝胶原溶液的固化方法为向水凝胶原溶液中加入体积百分比为1%的α-羟基异丁酰苯,在紫外光照射下聚合。
7.根据权利要求1所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述细胞悬液的数量通过细胞计数板计数。
8.根据权利要求7所述的用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列的制备方法,其特征在于:所述细胞计数板为改良式牛鲍氏计数板。
9.一种用于三维细胞球体生成的多孔水凝胶阵列,其特征在于,采用权利要求1~8任一项所述的制备方法制备得到。
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