[发明专利]检测绿原酸类化合物异构体的方法

说明书

本发明公开了检测绿原酸类化合物异构体的方法。该方法包括：将样品进行粉碎处理，以便得到样品粉末；将所述样品粉末进行超声提取，以便得到提取液；以及利用液相色谱‑串联三重四极杆质谱联用系统对所述提取液进行检测，以便获得所述绿原酸类化合物异构体的含量。该方法检测的速度快，准确性和灵敏度高。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体地，涉及检测绿原酸类化合物异构体的方法。

背景技术

绿原酸类化合物(chlorogenic acids，CGA)主要来源于忍冬科植物的干燥花蕾或杜仲、咖啡等，是一类由咖啡酸(Caffeic acid)与奎尼酸(Quinic acid，1-羟基六氢没食子酸)生成的缩酚酸类化合物。如图1所示，奎尼酸C3、C4和C5等多个位点均可以结合咖啡酸，此外，还有些类似咖啡酸的结构也可以和奎尼酸结合，因此，绿原酸类化合物有很多种。药理学的研究表明，绿原酸具有抗病原微生物、抗炎、解热、保肝、降血脂、止血、免疫调节等作用，临床主要用于治疗各种感染、炎症、高血脂、肿瘤放疗等。

目前，对绿原酸的功效成分研究主要为液相色谱法或是液相色谱-串联四极杆分析方法，但分析种类大多针对的是6种绿原酸类化合物的分析，而受分离技术的限制，对于6种以上的绿原酸类化合物的同时分离，目前仍面临着巨大的挑战。

由此，检测绿原酸类化合物异构体的方法有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种检测绿原酸类化合物异构体的方法，该方法检测速度快，准确度高，且能对多种绿原酸类化合物异构体进行检测。

研究表明，绿原酸类化合物，在包括金银花、山银花以及咖啡等食品中大量存在，且为各种异构体混合存在的模式，这些异构体的含量，会因物种、产地、加工方式等的差异而发生较大变化。而绿原酸类化合物的结构上的差异，又会对其的功效产生较大影响。受分离技术的限制，目前的分析方法仅仅是通过对6种绿原酸类标准品进行分离而开发的分析方法，这导致这些分析方法无法判断所分析的绿原酸类化合物的某个色谱峰是一纯品还是混合物，这也给后面的准确定量带来较大风险。由于某些含量很低的新型绿原酸类化合物，可能含有更高的功效，因此，开发快速、准确的绿原酸类化合物的分析方法就非常有必要。发明人通过优化样品的处理条件和检测条件，利用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱联用系统对食品中的绿原酸类化合物进行精准定量，整个分析过程快速，准确性和灵敏度高，并且能对8种绿原酸类化合物同时进行分离检测。

因而，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种检测绿原酸类化合物异构体的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将样品进行粉碎处理，以便得到样品粉末；将所述样品粉末进行超声提取，以便得到提取液；以及利用液相色谱-串联三重四极杆质谱联用系统对所述提取液进行检测，以便获得所述绿原酸类化合物异构体的含量。

根据本发明实施例的检测绿原酸类化合物异构体的方法，通过超声提取，对样品中的绿原酸类化合物异构体进行提取，待测化合物提取的更充分，且有效成分损失小。并利用液相色谱-串联三重四极杆质谱联用系统进行检测，检测的速度快，准确性和灵敏度高。

另外，根据本发明上述实施例的检测绿原酸类化合物异构体的方法，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，所述样品粉末的粒度不大于40目。

根据本发明的实施例，利用50％甲醇水溶液进行所述超声提取。

根据本发明的实施例，所述样品粉末与所述50％甲醇水溶液的比例为lmg：45-55mL。

根据本发明的实施例，所述超声提取的功率为300W，频率为40kHz，时间为45min。

根据本发明的实施例，所述液相色谱-串联三重四极杆质谱联用系统的流动相为：A：乙腈；B；0.1％甲酸水溶液。