[发明专利]一种多窦联合的脑静脉血栓动物模型及其构建方法

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体公开了一种多窦联合的脑静脉血栓动物模型及其构建方法。本发明通过半结扎联合氯化铁和凝血酶的方法，诱导出多个静脉窦联合血栓(如上矢状窦+横窦，上矢状窦+横窦+颈内静脉)，大面积静脉性脑梗死，脑出血等病理变化，且神经功能缺损更加严重、血栓持续时间更长的重症CVT动物模型，可用于重症CVT病理生理机制的研究和治疗策略的研究及评估，从而可能更有利于重症CVT患者的治疗和促进良好的预后、探寻新靶点和研发新型药物，以降低重症CVT患者的死亡率。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种脑静脉血栓动物模型。

背景技术

颅内静脉系统血栓形成(cerebral venous thrombosis,CVT)是一种不同于动脉性卒中的特殊类型的脑血管疾病，主要影响年轻人和儿童，是青年和中年卒中的重要原因，发病率有逐年增加的趋势，一项来自澳大利亚的流行病学调查显示，CVT年发病率为1.57/10万人/年，比以前报道的1.3/10万人更高，病变部位依次为多静脉窦[57.14％]、上矢状窦[16.19％]、横窦[11.43％]和乙状窦[8.57％]。约60％的CVT患者发生静脉性脑梗死或出血，即由闭塞的脑静脉窦或皮层静脉引起的脑组织局部水肿、出血。有静脉性脑梗死或出血的CVT属于重症CVT范畴，患者常有更严重的临床表现和更差的预后。有报道称，尽管颅内静脉血栓死亡率随着诊疗技术的发展在降低，但是严重的颅内静脉血栓患者死亡率仍高达34.2％，这可能与重症CVT的病理生理学机制目前仍然不是很清楚有关系。然而，脑静脉血栓动物模型对探讨其发病机制、病理生理学过程和治疗策略具有重要价值。

CVT动物模型能用来模拟人类的颅内静脉窦血栓形成，通过研究动物疾病模型，以便于对CVT这种疾病的病因及病理生理过程进行更深入的研究和探讨，从而有利于研发新的治疗靶点，促进疾病良好转归，所以CVT动物模型的科研价值是巨大的。

目前的CVT动物模型有永久性结扎型、临时阻断型、化学诱导型、介入型或插管型、植入自制移植物型、双极电凝型。永久性结扎型模型，能诱导上矢状窦血栓、静脉性脑梗死、脑出血病理变化，但是永久性结扎限制了治疗策略的研究；临时阻断型，操作简单，但是血栓不稳定；化学诱导型，同样也是操作简单，但是血栓不稳定，不能持续一周；介入或插管型，能诱导出上矢状窦血栓、静脉性脑梗死，但是操作比较复杂,耗材高昂；植入自制移植物型，操作简单，模拟上矢状窦血栓，但不是真正意义上的血栓形成，且不能用于治疗策略的研究；双极电凝型，适合研究皮层静脉血栓，但是创伤比较大。各类型模型优缺点见下表(表1引自中国现代神经疾病杂志)。

表1.各种脑静脉血栓模型制作方法优缺点

以上动物模型大部分诱导的单纯上矢状窦血栓，多窦联合血栓并且合并大面积静脉性脑梗死的重症CVT模型，目前国内外尚未见报道。而临床工作中以多窦联合血栓患者最为多见，所以，目前急需一种能模拟多窦联合的、人类重症CVT的动物模型。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种多窦联合的脑静脉血栓动物模型及其构建方法。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

第一方面，本发明提供了一种多窦联合的脑静脉血栓动物模型的制备方法，包括如下步骤：

(1)以非人动物为动物模型构建对象，麻醉后采用非吸收性外科缝线对上矢状窦(sss)进行半结扎；

(2)结扎后，在上矢状窦表面贴敷20～40％氯化铁溶液，贴敷时间为5～10分钟；优选采用40％氯化铁溶液贴敷5分钟；

(3)向上矢状窦的窦腔内注射凝血酶溶液，凝血酶的注射总量为150u。