[发明专利]BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法

说明书

本发明属于油菜分子育种技术领域，尤其涉及BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对BnaSVP基因靶向突变，通过多代自交分离，获得不同拷贝突变组合的纯合突变体。通过两个世代不同地区对获得的纯合突变体进行开花期调查发现，与野生型相比，四个拷贝纯合突变体的开花期提前最多，在两个地区分别提前了40.57％和50.71％。其他不同拷贝组合突变的纯合突变体的开花期产生不同程度的开花期提前的现象，结果证明BnaSVP基因调控开花期的提前存在突变拷贝数量的累加效应。本发明为油菜花期调控的遗传改良提供重要的功能基因和育种材料。

技术领域

本发明属于油菜分子育种技术领域，尤其涉及BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法。

背景技术

油菜不仅可以为人类提供食物油来源，而且也可以为动物提供丰富的蛋白质饲料，与此同时，油菜在工业生产上也起着十分重要的作用，因此，在农业生产中，油菜是一种必不可少的油料作物。油菜的开花期为农业生产上重要的农艺性状之一，合适的开花时间和开花周期可以使油菜的成熟期保持良好的一致性，进而在机械化收获过程中使机械化收获效率增加。开花时间是由一个复杂的遗传网络控制的，该遗传网络整合了许多内源性信号和环境刺激，例如春化、温度、光周期、赤霉素等。

甘蓝型油菜来源于甘蓝和白菜之间的自然杂交，是与拟南芥亲缘关系最近的农作物品种之一。截至目前为止，拟南芥中鉴定出了300多个与花期调控相关的基因，并且发现了控制开花期的各种途径中的许多关键调控因子。例如，FRIGIDA(FRI)，FLOWERING LOCUSC(FLC)和SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)是控制春化反应的必需基因，而CONSTANS(CO)基因在响应光周期反应过程中发挥至关重要的作用。另外还有FLOWERING LOCUS D(FLD)，FLOWERING LOCUS CA(FCA)和FLOWERING LOCUS KH DOMAIN(FLK)等一些基因可以通过抑制FLC基因的表达来促进花期的转变。在花期调控的ABCDE模型中，花发育的早期阶段，SVP和AGAMOUS-LIKE 24AGL24基因与APETALA1(AP1)相互作用，通过抑制B类PISTILLAT(API)和(AP3)、C类AGAMOUS(AG)和E类SEPALLATA1(SEP1)、SEP2、SEP3和SEP4基因来保证花期的精准调控。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用、具有不同开花期的油菜突变体材料的制备方法，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。本发明靶向甘蓝型油菜BnaSVP基因的四个同源拷贝，快速高效的获得了能稳定遗传的具有不同开花期的甘蓝型油菜种质资源，对油菜早熟品种的选育具有重要的意义。该突变体不含有T-DNA插入，和野生型相比，开花期显著提前。

本发明是这样实现的，BnaSVP基因在调控油菜花期中的应用，所述BnaSVP基因的四个拷贝的核苷酸序列分别为：SEQ ID NO.1所示的BnaA09.SVP，SEQ ID NO.2所示的BnaA04.SVP，SEQ ID NO.3所示的BnaC08.SVP，SEQ ID NO.4所示的BnaC04.SVP。

进一步地，所述BnaA09.SVP的氨基酸序列见SEQ ID NO.5，所述BnaA04.SVP的氨基酸序列见SEQ ID NO.6，所述BnaC08.SVP的氨基酸序列见SEQ ID NO.7，所述BnaC04.SVP的氨基酸序列见SEQ ID NO.8。