[发明专利]一种支气管过敏性咳嗽的动物模型的制备方法

说明书

本发明涉及组胺及柠檬酸诱导的支气管过敏性咳嗽的动物模型，结合支气管过敏性咳嗽的起病特点和规律，设计了组胺致敏，柠檬酸诱导咳嗽的动物模型，其治疗窗口较大，传统的抗过敏药物和镇咳药物均可起到较好的治疗作用，和临床上相关患者用药情况一致。因此，该动物模型可用于相关药物的评价和筛选。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种组胺及柠檬酸诱导的支气管过敏性咳嗽的动物模型的建立方法。

背景技术

支气管过敏性咳嗽，又称过敏性支气管炎，是一种在临床上非常常见的疾病。本病的发病率和支气管哮喘相类似，但是其受到空气污染的影响更大，在重污染地区其发病率可达支气管哮喘的2倍以上。其发病人群大部分为7岁以下的儿童，或50岁以上人群，30％以上的儿童干咳和过敏性咳嗽相关。通常患者本身可能有比较明确的过敏性疾病史：包括湿疹，过敏性鼻炎或过敏性皮炎等等。但支气管过敏性咳嗽，与支气管过敏性哮喘有一定的相似性，均会发生气管，支气管粘膜及周边组织的特异性炎症反应。过敏原，吸入粉尘，大气污染，呼吸道感染，甚至气候变化及着凉均可成为其致病因素。但与支气管过敏性哮喘不同，在支气管过敏性咳嗽中，气道发生炎症反应后发生痉挛的概率较低，而是以粘液分泌及支气管管壁持续性收缩为主。支气管管壁收缩，及过多的粘液会堵塞支气管，最终引起过敏性支气管炎及咳嗽等症状。

该疾病和传统的支气管过敏性哮喘或刺激物引起的咳嗽均不相同。其既有和过敏性支气管哮喘相似的特异性免疫反应，但较少发生支气管痉挛；同时其也有过敏性哮喘所没有的咳嗽等症状。而其咳嗽又是由特异性炎症反应引起的过量粘液分泌等原因造成，而非普通的支气管受到化学物刺激等因素引起的咳嗽。

所以常规的过敏性哮喘动物模型及咳嗽动物模型均并不能完整模拟其疾病状态。

目前，市面上尚且没有可以完整模拟过敏性咳嗽的动物模型。现在常见的相似模型，包括过敏性支气管哮喘的小鼠动物模型和刺激物诱导的咳嗽模型两种。其中，过敏性支气管哮喘模型，一般使用卵清蛋白(OVA)及氢氧化铝佐剂混合后，多小鼠多次免疫，再让小鼠吸入雾化的OVA溶液，进行攻击。该模型最终可引发支气管过敏性哮喘的相关症状，包括支气管痉挛引起的气道高反应性，和以嗜酸性粒细胞升高为主的炎症反应。而刺激物引起的咳嗽模型，则一般是以柠檬酸或辣椒素，直接雾化让小鼠吸入，引起反射性咳嗽。此外，也有人将上述两种方法结合，如“CN201811207445.1一种嗜酸性粒细胞性支气管炎症小鼠模型的建立和检测方法”中所述，将小鼠使用OVA致敏后，使用乙酰甲胆碱雾化激发，使其发生类似于嗜酸性粒细胞性支气管炎。叠加柠檬酸刺激后，发生嗜酸性粒细胞支气管炎背景下的咳嗽反应。

上述的两种动物模型，即过敏性支气管哮喘的小鼠动物模型和刺激物诱导的咳嗽模型，均有较大的局限性。过敏性支气管哮喘的小鼠动物模型，其主要变化为乙酰甲胆碱作用下，激活胆碱能受体导致的支气管痉挛等引起的呼吸功能改变。该模型与人的哮喘类似，虽由过敏原引起，但在模型的激发过程中，一般并不会发生过敏性咳嗽中的肥大细胞脱颗粒及粘液大量分泌等症状，也不会发生咳嗽，故该模型并不能很好的模拟过敏性咳嗽的发生发展过程。刺激物诱导的咳嗽模型，则只能激发类似人体条件反射功能的反射性咳嗽，并没有免疫反应参与其中。所以，上述两种模型均不能反应过敏性咳嗽的完整特点。而上述发明专利申请CN201811207445.1，所使用的先用OVA致敏，但并不使用OVA进行再次刺激攻击，而且直接使用乙酰甲胆碱进行刺激。在这种情况下，气道反应仍以哮喘性质的气道狭窄为主，并不会发生粘液分泌等过敏相关症状。如其描述，其引发的是嗜酸性粒细胞性支气管炎，但并非临床意义上的支气管过敏性咳嗽。

基于现有技术的缺陷，本发明结合支气管过敏性咳嗽的起病特点和规律，设计了组胺致敏后，以柠檬酸诱导咳嗽的模型，治疗窗口较大，传统的抗过敏药物和镇咳药物均可起到较好的治疗作用，和临床上相关患者用药情况一致。

发明内容