[发明专利]一种舞花姜组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种舞花姜组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)外植体的获得和消毒方法：在生长季节选取生长旺盛、无病虫害危害的舞花姜(Globba winitti)的幼嫩花蕾作为外植体，经消毒处理后，接入愈伤组织诱导培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，外植体产生愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.2-1.0毫克、2,4-二氯苯氧乙酸1.0-3.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(b)愈伤组织的增殖：将步骤(a)获得的愈伤组织接种到愈伤组织增殖培养基中进行愈伤组织的增殖，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的愈伤组织增殖培养基每升含有：2,4-二氯苯氧乙酸0.5-1.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(c)愈伤组织的脱分化：将步骤(a)或步骤(b)获得的愈伤组织转移到愈伤组织脱分化培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，愈伤组织脱分化形成体细胞胚，所述的愈伤组织脱分化培养基每升含有：噻苯隆0.5-1.5毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；将体细胞胚转移到不定芽诱导培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，体细胞胚分化成不定芽，所述的不定芽诱导培养基每升含有：噻苯隆0.05-0.15毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(d)不定芽继代增殖：将诱导出的不定芽切割成单芽后再继代培养于不定芽继代增殖培养基中进行不定芽的增殖，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的不定芽继代增殖培养基每升含有：6-苄基嘌呤1.0-2.0毫克、萘乙酸0.1-0.3毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(e)生根培养：当继代增殖的不定芽芽高2-3厘米高时，切下接种到生根培养基上进行生根培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的生根培养基每升含有：萘乙酸0.5-1.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为1/2MS培养基，pH 5.8-6.0；

(f)试管苗移栽：当生根培养得到的试管苗长至4-5厘米高时，在自然光照下炼苗，然后洗掉试管苗根部培养基，栽入栽培基质中，浇水遮荫，保温保湿，由此得到舞花姜种苗；所述的栽培基质包括泥炭土和珍珠岩，所述的泥炭土和珍珠岩的体积比为(2-5):1。

2.根据权利要求1所述的舞花姜组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述的消毒处理为先在体积分数75％酒精中浸泡20-40秒，再用质量分数0.1％升汞溶液消毒5-8分钟，无菌水冲洗4-5次后，再用质量分数0.1％升汞溶液消毒2-4分钟，无菌水冲洗4-5次。