[发明专利]一种三颗针多糖的提取方法

说明书

本发明公开了一种三颗针多糖的提取方法，包括以下步骤：仪器准备，准备好循环水多用真空泵、恒温水浴锅、数控超声波清洗器、紫外/可见分光光度计、台式高速冷冻离心机、电子分析天平和高速粉碎机，原料准备，准备好葡萄糖、浓硫酸、苯酚、无水乙醇、蒸馏水和三颗针，且上述试药均为国产分析纯试剂。该一种三颗针多糖的提取方法，在单因素试验基础上，采用响应面法试验设计对三颗针多糖的热水提取条件进行优化，以确定三颗针多糖的最佳提取工艺条件，有利于提高预测结果的可信度，能够快速确定多因素系统的最佳实验条件，且有利于为以三颗针为原料的植物多糖在中医药领域的进一步开发和利用提供参考。

技术领域

本发明涉及三颗针多糖提取技术领域，具体为一种三颗针多糖的提取方法。

背景技术

三颗针，为小檗科植物等多种植物的根、茎及树皮，具有清热燥湿，泻火解毒功效，现代药理学研究证实其具有广谱抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌，以及钩端螺旋体等均有抑制作用，同时研究证明植物多糖是药用植物水煎剂的主要成分，具有复杂的生物活性和功能，被认为是中药发挥传统治疗作用的主要药效物质之一，近年来，由于不同植物来源的多糖结构组成复杂多变、功能活性多种多样，关于多糖提取、分离等研究受到学者们的重视。

现今市场上常用的植物多糖提取方法有溶剂提取法、超声波辅助溶剂提取法、微波辅助溶剂提取法、超声-微波协同提取法、酶解法、超临界流体萃取法等，但上述提取方法操作比较繁琐，且提取过程中的液料比、提取温度、提取时间等均会对三颗针多糖得率造成影响，从而导致三颗针多糖提取效率低下，因此，我们便提出方便解决上述问题的三颗针多糖的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种三颗针多糖的提取方法，以便解决上述中所提出的现今市场上常用的植物多糖提取方法操作比较繁琐，且提取过程中的液料比、提取温度、提取时间等均会对三颗针多糖得率造成影响，从而导致三颗针多糖提取效率低下的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种三颗针多糖的提取方法，包括以下步骤：

S1：仪器准备，准备好循环水多用真空泵、恒温水浴锅、数控超声波清洗器、紫外/可见分光光度计、台式高速冷冻离心机、电子分析天平和高速粉碎机；

S2：原料准备，准备好葡萄糖、浓硫酸、苯酚、无水乙醇、蒸馏水和三颗针，且上述试药均为国产分析纯试剂；

S3：原料粉碎：将三颗针原料通过中草药粉碎机进行粉碎；

S4：滤渣获取：称取适量尺寸的三颗针粉末500g置于圆底烧瓶中，采用索氏提取器通过2L无水乙醇回流2.0h，回流完毕后进行过滤，挥干乙醇后保留滤渣备用；

S5：三颗针提取：精确称取2.0g三颗针固体粉末，按试验设计方案所需提取温度、提取时间、提取次数、液料比进行提取操作；

S6：三颗针离心：将提取后的提取液经80％体积的无水乙醇醇沉后离心，弃去上清液得到沉淀；

S7：三颗针多糖获取：将沉淀冷冻干燥后，即得到三颗针粗多糖；

S8：试验对比：通过试验筛选出提取三颗针多糖的最适条件。

优选的，所述步骤(六)的试验对比，包括如下步骤：

S1：对照品准备，将葡萄糖标准品放置在105℃下干燥至恒重，然后精密称取10mg于100mL容量瓶中，用蒸馏水溶解后定容，即可得到质量浓度为100μg/mL的葡萄糖标准储备液，并放置于4℃冰箱内储存备用；