[发明专利]一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法在审
| 申请号： | 202110015315.3 | 申请日： | 2021-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN112980829A | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 许桂红;刘海生;王柱;张宇翔;李兴华 | 申请（专利权）人： | 广东省造纸研究所有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/14 | 分类号： | C12N11/14;C12N9/20 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510300 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改性 滑石 负载 脂肪酶 制备 方法 | ||
1.一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将一定量乙酸和过氧化氢的混合物加入到镁铝水滑石中，在一定温度下，充分混合并反应一段时间，得到改性镁铝水滑石。
(2)将步骤(1)得到的改性产物进行离心洗酸，至上清液接近中性，然后干燥，干燥后研磨备用。
(3)将步骤(2)中乙酸改性的镁铝水滑石作为载体，在一定温度下负载一段时间，得到固定化脂肪酶。
(4)将步骤(3)得到的固定化脂肪酶进行洗涤，然后干燥，干燥后研磨备用。
(5)采用PNP等暗点法测定步骤(4)中固定化脂肪酶的活性，并对固定化脂肪酶进行回用。将反应后的固定化脂肪酶进行离心洗涤、离心，再次测定其活性，回用后的固定化脂肪酶活性可达到原来的80％以上。
2.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中采用乙酸和过氧化氢对水滑石进行改性。
3.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中改性条件：温度50℃-70℃，反应时间20-40min，乙酸与过氧化氢的体积比为1∶1-2。
4.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中离心上清液pH约为7，在40-45℃的条件下进行真空干燥。
5.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(3)中固定化脂肪酶的负载条件：温度30-40℃，负载时间6-16h。
6.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(4)中固定化脂肪酶离心后的干燥条件：40-45℃真空干燥。
7.根据权利要求1所述的一种酸改性水滑石负载脂肪酶的制备方法，其特征在于，步骤(5)中固定化脂肪酶、PBS(pH＝8)、底物溶液的比例为1∶60∶20，孵育温度为37-40℃，时间为10-15min。
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