[发明专利]用于合成适用于在大规模生产培养肉中使用的可食用且可灭菌的多孔3D支架的方法

权利要求书

1.用于获得能够灭菌的大孔三维(3D)组织工程支架的方法，所述支架包含至少一种相互交联的生物相容性聚合物的网络，其中所述方法包括以下步骤：

a)制备所述至少一种生物相容性聚合物的溶解液，

b)将步骤a)的溶液倒入模具中并冷冻，优选在低于所述溶液的冷冻温度的温度下冷冻；

c)将步骤b)中获得的冷冻支架冻干；

d)使步骤c)的经冻干的支架固化，以及

e)通过热蒸汽对所述支架进行灭菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物相容性聚合物选自天然聚合物、合成聚合物、或其任何变体。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述天然聚合物或其任何变体选自由以下组成的列表：葡聚糖、藻酸盐、壳聚糖、淀粉、肝素、硫酸肝素、普鲁分支葡聚糖、纤维素、半纤维素、葡甘露聚糖、琼脂、硫酸软骨素、明胶、几丁质、多核苷酸、多糖、糖胺聚糖、天然聚酯、或其任意组合，优选地，所述天然聚合物或其任何变体选自壳聚糖和/或藻酸盐。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述合成聚合物或其任何变体选自由以下组成的列表：聚乳酸、聚乙醇酸、聚(乳酸-共-乙醇酸)、聚羟基链烷酸酯、生物酯、或其任意组合。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述聚合物的分子量在1000Da至5000000Da，优选地10000Da至1000000Da，更优选地100000Da至500000Da的范围内。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中在步骤a)中，将所述聚合物溶解在选自由以下组成的列表的溶剂中：水溶液、有机溶剂、培养基、或其任意组合。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述聚合物在步骤a)的所述溶液中的重量/体积百分比在0.5％至16％，优选地1％至8％，更优选地1.5％至4％的范围内。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中步骤a)的pH在1至14，优选地2至10的范围内；以及步骤a)的温度在22℃至180℃，优选地30℃至70℃的范围内。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中步骤b)的所述支架通过经由直接挤出对所述溶解液进行模塑或者通过在不同形状和尺寸的模具中模塑来形成。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中步骤b)的所述冷冻温度在-15℃至-80℃的范围内。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中步骤c)的所述冻干在1×10^-4毫巴至2.6×10^-4毫巴，优选地1毫巴至0.4毫巴，更优选0.263毫巴的范围内的压力下以及在25℃至-100℃，优选地20℃至-50℃，并且更优选地-15℃至-45℃的范围内的温度下进行至少16小时至96小时，优选地24小时至72小时，更优选地18至24的范围内的一段时间。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中步骤d)的固化过程为在30℃至180℃的范围内的温度下进行1分钟至48小时的范围内的一段时间的热固化过程。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中步骤e)的所述灭菌能够任选地通过物理灭菌或化学灭菌，优选物理灭菌过程，来进行。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中还任选地包括：在步骤a)中和/或在步骤c)与步骤d)之间的另外的步骤中，添加至少一种添加剂、至少一种黏附分子、至少一种交联剂和/或其任意组合。