[发明专利]用于治疗疾病的靶向转移RNA

权利要求书

1.组合物，其包含：

工程化的tRNA变体，其相对于SEQ ID NO:3-22或103-122中任一项的核酸序列在T环、T-茎、D-环、D-茎、可变环、反密码子茎或反密码子环中包含突变，

其中在向受试者施用后，相对于使用缺乏过早终止密码子的可比较的mRNA产生的可比较的多肽，所述工程化的tRNA变体能够通过抑制编码基本上全长的多肽的靶mRNA中的过早终止密码子恢复至少10％的所述基本上全长的多肽的产生，这通过以下确定：

a)将编码所述工程化的tRNA或其变体的第一载体和编码筛查mRNA的第二载体转染到第一人细胞中，所述筛查mRNA编码第一绿色荧光蛋白，其中编码所述第一绿色荧光蛋白的所述筛查mRNA包含所述过早终止密码子；

b)将编码可比较的筛查mRNA的第三载体转染到第二人细胞中，所述可比较的筛查mRNA编码第二绿色荧光蛋白，其中所述可比较的筛查mRNA不包含所述过早终止密码子；和

c)比较从所述第一人细胞和所述第二人细胞发出的荧光的量。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述工程化的tRNA变体与SEQ ID NO:23-48或123-148中的任一项具有至少70％的序列同一性。

3.如权利要求1或2如的组合物，其中所述工程化的tRNA变体包含与SEQ ID NO:6或106至少70％相同的序列，并且在SEQ ID NO:6或106的位置2、4、6、12、23、27、28、31、39、40、42、43、44、46、49、50、64、65、67、69或71处具有取代。

4.如权利要求3所述的组合物，其中位置2处的取代是取代为C，位置4处的取代是取代为C，位置6处的取代是取代为T，位置6处的取代是取代为A，位置12处的取代是取代为C，位置23处的取代是取代为G，位置27处的取代是取代为C，位置28处的取代是取代为C，位置31处的取代是取代为C，位置39处的取代是取代为G，位置40处的取代是取代为C，位置42处的取代是取代为G，位置43处的取代是取代为G，位置44处的取代是取代为G，位置46处的取代是取代为A，位置49处的取代是取代为G，位置50处的取代是取代为T，位置64处的取代是取代为A，位置65处的取代是取代为C，位置67处的取代是取代为A，位置67处的取代是取代为T，位置69处的取代是取代为G，位置71处的取代是取代为C，或位置71处的取代是取代为G。

5.如权利要求3或4所述的组合物，其中除了取代之外，所述工程化的tRNA变体的序列与SEQ ID NO:6或106相同。

6.如权利要求3-5中任一项所述的组合物，其中如通过代理测量、半衰期测量、氨基酸装载效率测量或与合成酶或核糖体机构结合的测量所确定的，与包含SEQ ID NO:6或106中提供的序列的可比较的tRNA相比，所述工程化的tRNA变体表现出增加的体内稳定性。

7.如权利要求1-6中任一项所述的组合物，其中所述工程化的tRNA变体包含SEQ IDNO:45或145的序列。

8.如权利要求1或2所述的组合物，其中所述工程化的tRNA变体包含与SEQ ID NO:3或103中任一项至少70％相同的序列，并且在SEQ ID NO:3或103的位置2、6、13、15、22、28、31、37、39、42、44、50、64、67、71或72处具有取代。

9.如权利要求8所述的组合物，其中位置2处的取代是取代为G，位置6处的取代是取代为G，位置13处的取代是取代为C，位置15处的取代是取代为G，位置22处的取代是取代为G，位置28处的取代是取代为C，位置31处的取代是取代为A，位置37处的取代是取代为G，位置39处的取代是取代为T，位置42处的取代是取代为G，位置44处的取代是取代为A，位置50处的取代是取代为C，位置64处的取代是取代为G，位置67处的取代是取代为C，位置71处的取代是取代为C，或位置72处的取代是取代为C。