[发明专利]用于捕获和纯化生物制品的方法

权利要求书

1.一种用于制造生物制品的方法，所述方法包括：

在生物反应器中培养宿主细胞，所述宿主细胞产生生物制品并任选地分泌所述生物制品；

从所述生物反应器中去除培养基和/或细胞悬浮液；

处理所述培养基和/或细胞悬浮液以分离含有所述生物制品的滤液；

将所述滤液加载到至少两个捕获柱上以捕获所述生物制品；

从所述至少两个捕获柱上洗脱第一生物产物；

将所述第一生物产物加载到一个或多个纯化柱上；以及

从所述一个或多个纯化柱上洗脱第二生物产物；

其中所述生物反应器具有生物反应器体积，所述至少两个捕获柱具有总捕获柱体积，并且其中所述生物反应器体积与所述总捕获柱体积的比率在约500:1至约10:1的范围内。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述生物制品包括重组蛋白、病毒颗粒或抗体中的一种或多种。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述重组蛋白是由所述宿主细胞产生的分泌蛋白、膜蛋白或细胞内蛋白。

4.如权利要求3所述的方法，其中将所述重组蛋白从细胞和细胞器分离到所述滤液中。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中将所述滤液通过过滤或离心进行分离。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中按顺序加载所述至少两个捕获柱以提供将所述滤液连续加载到所述至少两个捕获柱上。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中将所述滤液以每小时约0.5至约100柱体积(CV)范围内的滤液加载速率加载到所述至少两个捕获柱上。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中将所述滤液加载到所述至少两个捕获柱上以提供每个捕获柱的捕获柱加载时间小于48小时。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述生物制品包含重组人溶酶体蛋白。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个阴离子交换色谱(AEX)柱。

11.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个亲和色谱柱。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述亲和色谱柱包括蛋白A柱和蛋白Z柱中的一种或多种。

13.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个阳离子交换色谱(CEX)柱。

14.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个固定化金属亲和色谱(IMAC)柱。

15.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个尺寸排阻色谱柱。

16.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述至少两个捕获柱包括至少两个疏水相互作用色谱(HIC)柱。

17.如权利要求1-9和11-16中任一项所述的方法，其中所述一个或多个纯化柱包括一个或多个阴离子交换色谱(AEX)柱。

18.如权利要求1-10和13-16中任一项所述的方法，其中所述一个或多个纯化柱包括一个或多个亲和色谱柱。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述亲和色谱柱包括蛋白A柱和蛋白Z柱中的一种或多种。