[发明专利]生成去核红系细胞的方法在审
| 申请号： | 202080050260.3 | 申请日： | 2020-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN114127252A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | J.利普西茨;B.J.佩雷拉;B.王;A.吉尔伯特 | 申请（专利权）人： | 鲁比厄斯治疗法股份有限公司 |
| 主分类号： | C12M1/24 | 分类号： | C12M1/24;C12M1/34;C12M3/00;C12N5/00;C12N5/078 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 张文辉 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生成 去核红系 细胞 方法 | ||
1.生成去核红系细胞群的方法，所述方法包括：
(a)将一定体积的红系祖细胞的第一细胞培养物布置到包含在灌注生物反应器内的第二培养基中，以提供具有约0.1x105个细胞/mL至约1x107个细胞/mL的初始细胞密度的第二细胞培养物；
(b)灌注培养所述第二细胞培养物约2天至约15天；
(c)将一定体积的步骤(b)的所述第二细胞培养物布置到包含在灌注生物反应器内的第三培养基中，以提供具有约1x105至约1x107个细胞/mL的初始细胞密度的第三细胞培养物；
(d)灌注培养步骤(c)的所述第三细胞培养物约5天至20天，
其中在步骤(d)之后，所述第三培养基包含去核红系细胞群。
2.权利要求1所述的方法，其中所述方法在步骤(a)之前进一步包括：
(i)将多个红系祖细胞布置于包含在器皿内的第一培养基中，以提供具有约0.1x105个细胞/mL至约2x106个细胞/mL的初始细胞密度的所述第一细胞培养物；和
(ii)分批或补料分批培养所述第一细胞培养物约1天至约15天。
3.权利要求2所述的方法，其中步骤(i)中的所述器皿是摇瓶。
4.权利要求3所述的方法，其中所述摇瓶具有约15mL至约5L的体积。
5.权利要求4所述的方法，其中所述摇瓶具有约50mL至约1.5L的体积。
6.权利要求5所述的方法，其中所述摇瓶具有约100mL至约500mL的体积。
7.权利要求2-6中任一项所述的方法，其中步骤(ii)包括以0.1xg至约4.1xg温育所述摇瓶。
8.权利要求7所述的方法，其中步骤(ii)包括以约0.23xg至约1.78xg温育所述摇瓶。
9.权利要求2所述的方法，其中步骤(i)中的所述器皿是摇管。
10.权利要求9所述的方法，其中所述摇管具有约2mL至约500mL的体积。
11.权利要求10所述的方法，其中所述摇管具有约10mL至约250mL的体积。
12.权利要求11所述的方法，其中所述摇管具有约50mL至约200mL的体积。
13.权利要求9-12中任一项所述的方法，其中所述摇管是锥形容器。
14.权利要求9-13中任一项所述的方法，其中步骤(ii)包括以约0.1xg至约4.1xg温育所述摇管。
15.权利要求14所述的方法，其中所述步骤(ii)包括以约0.23xg至约1.78xg温育所述摇管。
16.权利要求2所述的方法，其中步骤(i)中的所述器皿是培养袋。
17.权利要求16所述的方法，其中所述培养袋具有约50mL至约25L的体积。
18.权利要求17所述的方法，其中所述培养袋具有约50mL至约5L的体积。
19.权利要求18所述的方法，其中所述培养袋具有约50mL至约500mL的体积。
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