[发明专利]为癌症肿瘤定制的低免疫纳米囊泡递送系统

说明书

提供了低免疫原性诱导多能干细胞(iPSC)衍生的仿生纳米囊泡(hypo‑bioNV)，这些hypo‑bioNV包含经定制的嵌合抗原受体(CAR)，该嵌合抗原受体可通过抗体片段scFV区域或病毒表位识别受体(VERR)识别靶标生物标志。提供了一种制备hypo‑bioNV的方法。提供了一种通过以下来治疗患有癌症的个体的方法：向个体施用这些hypo‑bioNV、靶向癌细胞和治疗该癌症。提供了一种通过以下来靶向个体的细胞的方法：向个体施用这些hypo‑bioNV和靶向待破坏或待治疗的细胞。

发明背景

1.技术领域

本发明涉及用于递送治疗剂和基因编辑化合物的组合物和方法。

2.背景技术

将基因编辑治疗剂在体内有效地靶向递送至患病细胞仍然是现代生物技术面临的最大挑战之一。即使最近有所改进，递送机制始终存在抑制性问题，例如靶向不一致且低频、靶向适应性低、缺乏非自体方法、高度免疫中和、制造成本高、监管障碍(FDA临床持有)、产量/收集量/扩增量低、包装尺寸限制、低效包装、器官沉降(organ sinking)(肝脏和骨髓)、递送囊泡半衰期短和IP锁定(IP lock-up)。

AAV(腺相关病毒)是一种载体，通常用作基因编辑治疗剂的载体。AAV的大小约为22nm。AAV具有较高的肝沉降(尽管新突变体的较低)、有限的剂量(尽管新血清型的较高)、约1100个氨基酸的大小限制，大多数血清型是可扩展的，并且靶向效率受血清型嗜性的限制。

脂质体也可用作递送机制。脂质体的大小为50-1000nm。器官沉降和中和作用包括RES(网状内皮系统)、EPR(增强通透性和保留)、ABC(加速血液清除)、CARPA(补体激活相关的假性过敏)和调理作用。免疫中和是不同的并且依赖于配体。没有大小限制，但主动负载对于大多数化合物来说是有必要的，这很昂贵。制造还可以涉及配体添加或聚乙二醇化。脂质体是配体靶向的并且具有较差的肿瘤渗透性。

可调的树状大分子为1.5至10nm。它们与血液蛋白高度相互作用，并且增加了IgG巨噬细胞Fc清除率。包装限制包括外部缀合的核酸。可调的树状大分子尚未经过基因编辑用途的广泛测试。

聚合物胶束的大小为10-100nm。没有已知的器官沉降或中和作用或免疫中和。可能没有大小限制，并且它们还未经过基因编辑的广泛测试。聚合物胶束是配体靶向的和可诱导/可释放的刺激物。

外泌体的大小为30-150nm。它们的器官沉降和中和作用程度很高，但新突变体的可能会较低。它们具有低免疫原性，但其程度因每种配体而异。没有大小限制，但它们的负载效率非常低。治疗量的生产也很困难。外泌体是配体靶向的，并且具有平均肿瘤渗透性。

CAR T细胞也已被用于靶向细胞以治疗癌症。CAR T细胞疗法是一种需要收集患者自身的免疫细胞(T细胞)来治疗癌症的癌症疗法。T细胞通常攻击侵入性微生物，但在CAR T细胞疗法中，T细胞被重新工程化以攻击癌细胞。首先，T细胞从患者的血液中分离出来，并经过基因工程化以在其表面产生嵌合抗原受体(CAR)，使这些T细胞能够附着在特定的肿瘤抗原上。CAR并非天然存在的，而是由合成抗体的片段组成。CAR依靠T细胞内的信号传导和共刺激结构域来发挥作用。

一旦产生了CAR T细胞，它们就会扩增以大量产生，然后可以输回患者体内。通常地，患者在输注前已接受化学疗法以耗尽其淋巴细胞。CAR T细胞受其设计针对的癌细胞上的肿瘤抗原所吸引，并杀死具有这些抗原的癌细胞。