[发明专利]用于修饰SCN9A或SCN10A基因的基因编辑系统及其使用方法

权利要求书

1.一种用于修饰钠电压门控通道α亚基9(SCN9A)基因的基因编辑系统，所述基因编辑系统包含：

(a)RNA引导的DNA核酸内切酶或第一多核苷酸部分，所述第一多核苷酸部分包含编码所述RNA引导的DNA核酸内切酶的第一核苷酸序列；以及

(b)第二多核苷酸部分，所述第二多核苷酸部分包含编码向导RNA(gRNA)的第二核苷酸序列，其中所述gRNA包含SEQ ID NO:1-20中任一者的核苷酸序列。

2.如权利要求1所述的基因编辑系统，其中：(i)(a)的所述RNA引导的DNA核酸内切酶是酿脓葡萄球菌Cas9(SpCas9)；以及(ii)(b)的所述gRNA包含SEQ ID NO:1-10中任一者的核苷酸序列。

3.如权利要求2所述的基因编辑系统，其中(b)的所述gRNA包含SEQ ID NO:1、3-5和9中任一者的核苷酸序列。

4.如权利要求1所述的基因编辑系统，其中：(i)(a)的所述RNA引导的DNA核酸内切酶是金黄色葡萄球菌Cas9(SpCas9)；以及(ii)(b)的所述gRNA包含SEQ ID NO:11-20中任一者的核苷酸序列。

5.如权利要求4所述的基因编辑系统，其中(b)的所述gRNA包含SEQ ID NO:11-16和18-20中任一者的核苷酸序列。

6.如权利要求1-5中任一项所述的基因编辑系统，其中(b)的所述gRNA还包含支架序列。

7.如权利要求4-6中任一项所述的基因编辑系统，其中(b)的所述gRNA包含SEQ ID NO:11-20中任一者的核苷酸序列，并且所述支架序列包含SEQ ID NO:41的核苷酸序列。

8.如权利要求1-7中任一项所述的基因编辑系统，其中(a)中编码所述RNA引导的核酸内切酶的所述第一核苷酸序列还包含编码核定位信号(NLS)的核苷酸序列，所述核苷酸序列与所述RNA引导的DNA核酸内切酶框内融合。

9.如权利要求8所述的基因编辑系统，其中所述NLS是SV40NLS。

10.如权利要求1-9中任一项所述的基因编辑系统，其中(a)的所述第一多核苷酸部分和(b)的所述第二多核苷酸部分是不同多核苷酸。

11.如权利要求10所述的基因编辑系统，其中所述不同多核苷酸中的至少一者是病毒载体。

12.如权利要求11所述的基因编辑系统，其中所述一种或多种病毒载体是一种或多种腺相关病毒(AAV)载体。

13.如权利要求1-12中任一项所述的基因编辑系统，其中单个多核苷酸包含(a)的所述第一多核苷酸部分和(b)的所述第二多核苷酸部分。

14.如权利要求13所述的基因编辑系统，其中所述单个多核苷酸是病毒载体。

15.如权利要求14所述的基因编辑系统，其中所述病毒载体是腺相关病毒(AAV)载体。

16.一种核酸，所述核酸包含权利要求14所述的单个多核苷酸。

17.一种病毒颗粒或病毒颗粒组，所述病毒颗粒或病毒颗粒组集合地包含权利要求1-15中任一项所述的基因编辑系统。

18.如权利要求17所述的病毒颗粒或病毒颗粒组，所述病毒颗粒或病毒颗粒组是一种或多种腺相关病毒(AAV)颗粒。