[发明专利]包含可负载抗原呈递多肽的工程化红系细胞及使用方法

权利要求书

1.一种工程化去核红系细胞，其包含细胞表面上的可负载外源性抗原呈递多肽，其中所述可负载外源性抗原呈递多肽包含一个或多个氨基酸取代，所述一个或多个氨基酸取代使所述细胞表面上的所述可负载外源性抗原呈递多肽稳定化。

2.根据权利要求1所述的工程化去核红系细胞，其中所述可负载外源性抗原呈递多肽在不存在与所述外源性抗原呈递多肽结合的多肽的情况下是稳定化的。

3.根据权利要求1或2所述的工程化去核红系细胞，其还包含与所述可负载外源性抗原呈递多肽结合的外源性抗原性多肽。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述可负载外源性抗原呈递多肽对所述外源性抗原性多肽比对外源性可置换多肽具有更高的亲和力。

5.根据权利要求3或4所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽以约1皮摩尔至约100纳摩尔的K_D与所述可负载外源性抗原呈递多肽结合。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽包含表7-8、16-26或B中任一项所提供的氨基酸序列。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽包含表7所提供的氨基酸序列。

8.根据权利要求3-7中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽与所述可负载外源性抗原呈递多肽非共价附接。

9.根据权利要求3-7中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽与所述可负载外源性抗原呈递多肽共价附接。

10.根据权利要求9所述的工程化去核红系细胞，其中所述外源性抗原性多肽通过接头与所述可负载外源性抗原呈递多肽共价附接。

11.根据权利要求9或10所述的工程化去核红系细胞，其中外源性抗原性多肽包含反应性官能团，所述反应性官能团与所述可负载外源性抗原呈递多肽的氨基酸残基形成共价键，其中所述反应性官能团是选自以下的二氮杂环丙烯基团或硫醇反应性官能团：(i)2-氰基苯并噻唑(CBT)；(ii)马来酰亚胺或马来酰亚胺衍生物；(iii)芳基丙腈；(iv)砜；(v)丙二烯酰胺(allenamide)；(v)二溴哒嗪二酮；(vi)二硫化物；和(vii)卤代乙酰胺。

12.根据权利要求11所述的工程化去核红系细胞，其中所述反应性官能团是硫醇反应性官能团，并且所述外源性抗原性多肽与所述可负载外源性抗原呈递多肽的半胱氨酸残基共价连接。

13.根据权利要求1或2所述的工程化去核红系细胞，其中所述可负载外源性抗原呈递多肽包含接头，其中所述接头包含用于缀合外源性抗原性多肽的受体序列。

14.根据权利要求10-13中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述接头为约10个氨基酸至30个氨基酸长度。

15.根据权利要求10-14中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述接头为约15个氨基酸残基长度。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的工程化去核红系细胞，其中所述可负载外源性抗原呈递多肽包含跨膜结构域。

17.根据权利要求16所述的工程化去核红系细胞，其中所述跨膜结构域包含1型膜蛋白的跨膜结构域。

18.根据权利要求17所述的工程化去核红系细胞，其中所述1型膜蛋白包含血型糖蛋白A(GPA)。