[发明专利]减毒的支气管败血性博德特菌菌株、包含该减毒的菌株的口服疫苗及其制备和使用方法

说明书

本发明提供了减毒的aroA突变型支气管败血性博德特菌菌株，其有效地在动物中引发针对支气管败血性博德特菌的免疫应答。还提供了免疫原性组合物和疫苗，其包含所述减毒的aroA突变型支气管败血性博德特菌菌株。还提供了用于与此类组合物和疫苗一起使用的试剂盒。还提供了向动物口服施用减毒的aroA突变型支气管败血性博德特菌菌株、组合物和疫苗的方法。

对相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年1月4日提交的美国临时申请62/788,764的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

通过引用并入

本文引用的所有参考文献均通过引用整体并入本文。

关于序列表的声明

与本申请相关的序列表以TXT格式代替纸质副本提供，并在此通过引用并入说明书。包含序列表的TXT文件的名称是MER 17-336_ST25(sequence listing).txt。该TXT文件为22KB；它创建于2019年12月20日；并且正在与说明书的提交一起通过EFS-Web以电子方式提交。

发明领域

本发明大体上涉及支气管败血性博德特菌(Bordetella bronchiseptica)菌株、组合物和疫苗，以及其制造和使用方法。

背景

在兽医学中，支气管败血性博德特菌导致一系列由宿主决定的病理，并且它导致犬、猪和兔的严重疾病。在猪中，支气管败血性博德特菌和多杀性巴氏杆菌(P.multocida)结合引起萎缩性鼻炎。在犬科动物中，支气管败血性博德特菌引起急性气管支气管炎，其典型特征是刺耳的、雁鸣式的“犬舍”咳嗽。这种咳嗽也可能由犬腺病毒-2(cAV2)和/或犬副流感病毒(cPI2)引起。在猫科动物中，支气管败血性博德特菌感染与气管支气管炎、结膜炎和鼻炎(所谓的“上呼吸道感染”或“URI”)、下颌淋巴结病和肺炎有关。然而，猫URI也可能由疱疹病毒、杯状病毒、枝原体属物种(Mycoplasma spp.)和/或鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci)引起。

支气管败血性博德特菌因高频相变异和抗原调节而闻名(Monack,D.M.,等人,“Phase Variants of Bordetella bronchiseptica Arise by Spontaneous Deletionsin the Vir Locus.”Molecular Microbiology,vol.3,no.12,1989,pp.1719-1728)。因此，从一种菌株到另一种菌株，以及取决于培养条件，抗原决定簇的表达水平可变化并影响灭活的疫苗制剂的免疫原性。经典地，在37℃下生长的支气管败血性博德特菌菌株(例如RB50)产生与毒力有关并且已知是重要的抗原决定簇的蛋白质，包括腺苷酸环化酶-溶血素(Ac-Hly)、III型分泌系统效应物(BteA)、丝状血凝素(FHA)、百日咳杆菌粘附素(PRN)和菌毛(FIM；由名为vag的毒力激活基因编码)。然而，当在25℃或37℃下在MgSO₄或烟酸的存在下生长时，该细菌抑制这些毒力因子的产生。此外，在这些条件下，称为vrg的毒力抑制基因(例如编码鞭毛的基因)的表达被激活。