[发明专利]一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法在审
| 申请号： | 202011644010.0 | 申请日： | 2020-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN114686513A | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 邢少辰;王云鹏;韦正乙;蔡玉红;范杰英 | 申请（专利权）人： | 吉林省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京卓岚智财知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11624 | 代理人： | 郭智 |
| 地址： | 130000 吉林省长*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因 枪介导 玉米 骨干 自交系 遗传 转化 方法 | ||
1.一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：先通过消毒水对成熟的玉米种子进行浸泡消毒，并用蒸馏水冲洗干净，风干处理；
S2：将玉米种子的幼胚在预培养基中进行预培养，得到预培养后的成熟胚；
S3：采用基因枪法将含有目的基因的载体轰击至成熟胚中；
S4：将成熟胚放置成熟培养基中进行培养得到幼苗。
2.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S1中的消毒水内含有6％浓度的NaClO和2％浓度的NaCl，所述玉米种子需要在消毒水中浸泡25分钟。
3.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S2中的预培养基由溶质和溶剂组成，溶质及其在预培养基中的浓度为0.6mg/IBA，1.7g/LKNO3，0.22g/LKH2PO4，0.003g/LH3BO3和25g/L蔗糖，溶剂为水。
4.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S2中幼胚的预培养需要在25℃的黑暗环境下培养5天。
5.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S3中基因枪轰击的参数设置为，DNA浓度：2-4μg/μl；轰击次数：1-3次；目标距离：2-5cm；轰击压力：1050-1400psi；真空度：25-30mmH。
6.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S4中的成熟培养基中包括4mg·L-12,4-D、0.1mg·L-1KT，0.4mg·L-1IBA/MS，50μL2.5mol/LCaCl2，0.0425g/L-NA2EDTA·2H2O，0.00031g/L-Na2MoO4·2H2O和0.013g/L-MnSO4·4H2O。
7.根据权利要求1所述的一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，其特征在于：所述S4中成熟胚需要在24℃-26℃的黑暗环境下培养15-20天。
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